目的 探讨Notch3信号通路对三阴性乳腺癌细胞株BT20活性的影响及分子机制.方法 采用小干扰RNA(siRNA)转染技术,下调BT20细胞中Notch3 mRNA表达,MTT法检测转染后5 d的细胞增殖情况,并进行Tran-swell细胞迁移和侵袭实验;RT-PCR检测BT20细胞中CyclinD1、BCL-2、BCL-xl mRNA表达水平;Western blot检测BT20细胞核内NF-κB蛋白表达水平.结果 培养第2天、第3天、第4天、第5天时,Notch3 siRNA组细胞增殖水平明显低于空白对照组与阴性对照组,差异均有统计学意义(t分别=3.15、4.03、2.94、3.26、4.01、3.50、2.97、3.11,P均<0.05);随着培养时间的延伸,三组细胞增殖水平均逐渐增加,差异均有统计学意义(F分别=5.94、7.65、9.76,P均<0.05).Notch3 siRNA组迁移细胞数、侵袭细胞数均明显低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义(t分别=5.32、6.02、4.97、5.07,P均<0.05);空白对照组与阴性对照组迁移细胞数、侵袭细胞数比较,差异均无统计学意义(t分别=0.39、0.57,P均>0.05).Notch3 siRNA组细胞核内NF-κB蛋白相对表达量明显低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义(t分别=19.69、18.07,P均<0.05).Notch3 siRNA组下游基因CyclinD1、BCL-2、BCL-xl mRNA的相对表达量均明显低于空白对照组和阴性对照组,差异均有统计学意义(t分别=4.15、3.02、3.12、2.98、3.56、3.16,P均<0.05).结论 Notch3 siRNA下调Notch3表达能够有效抑制BT20细胞增殖、迁移和侵袭,其机制可能与Notch3表达下调降低了NF-κB蛋白及CyclinD1、BCL-2、BCL-xl基因表达有关.

三阴性乳腺癌;Notch3;RNA干扰;NF-κB

金海丽;陈嬉;罗华荣;徐铖;孙亚萌;林天真;甘梅富

318050 浙江台州,台州医院[台州恩泽医疗中心(集团)恩泽医院]病理科

全科医学临床与教育

[1]金海丽;陈嬉;罗华荣;徐铖;孙亚萌;林天真;甘梅富-.Notch3信号通路对三阴性乳腺癌细胞株BT20活性的影响及分子机制)[J].全科医学临床与教育,2022(07):588-591,606

BT20

Notch3,三阴性乳腺癌细胞,细胞株,小干扰,siRNA,转染,MTT,Tran,swell,细胞迁移和侵袭,CyclinD1,BCL,xl,blot,细胞核,蛋白表达水平,天时,空白对照,培养时间,白相,相对表达量,白及

0.143285