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典型文献
烟草五种土传病原菌的多重PCR快速检测
文献摘要:
[目的]建立一种可同时检测烟草黑胫病菌(Phytophthora parasitica)、青枯病菌(Ralstonia solanacearum)、立枯病菌(Rhizoctonia solani)、根腐病菌(Fusarium oxysporum)和根黑腐病菌(Thielaviopsis basicola)5 种烟草重要土传病原菌的五重 PCR快速检测方法.[方法]筛选5种病原菌的特异性引物组合,通过不同的引物浓度和退火温度对多重PCR体系进行优化,检测体系的灵敏度,并对土壤和植株样品进行测试,验证其实用性.[结果]根据青枯病菌fliC基因、立枯病菌RPB2基因、根腐病菌C0I 基因以及根黑腐病菌TEF1基因设计特异性引物,并结合己报道的黑胫病菌parA1基因的特异性引物,成功建立5种烟草土传病害的多重PCR检测方法.反应体系(25 μL):Sf1/Sr1、Ff1/Fr1、Pf1/Pr1每条引物分别0.3 μL,Rf1/Rr1每条引物各1.8μL,TBf1/TBr1每条引物各1μL,2×PCR Mix 12.5 μL,退火温度为58℃,灵敏度可达到100 pg/)μL.[结论]本研究建立的多重PCR体系能够同时快速检测烟草黑胫病菌、青枯病菌、立枯病菌、根腐病菌和根黑腐病菌以及田间带菌烟草病株和土壤,为田间烟草土传病害的早期诊断提供依据.
文献关键词:
烟草;土传病害;分子检测;五重PCR
作者姓名:
舒芳玲;范东升;张得平;蓝达愉;林纬;卢燕回;袁高庆
作者机构:
广西大学农学院,南宁530004;中国烟草总公司广西壮族自治区公司,南宁530022
文献出处:
引用格式:
[1]舒芳玲;范东升;张得平;蓝达愉;林纬;卢燕回;袁高庆-.烟草五种土传病原菌的多重PCR快速检测)[J].中国烟草学报,2022(05):95-103
A类:
basicola,C0I,parA1,Sf1,Ff1,Pf1,Rf1,Rr1,TBf1,TBr1
B类:
土传病原菌,同时检测,烟草黑胫病菌,Phytophthora,parasitica,青枯病菌,Ralstonia,solanacearum,立枯病,Rhizoctonia,solani,根腐病菌,Fusarium,oxysporum,根黑腐,黑腐病菌,Thielaviopsis,五重,快速检测方法,特异性引物,退火温度,检测体系,植株,fliC,RPB2,TEF1,土传病害,反应体系,Sr1,Fr1,Pr1,Mix,pg,田间,带菌,病株,分子检测
AB值:
0.299706
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