典型文献
流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株囊膜蛋白的原核表达及其兔抗血清的制备
文献摘要：
目的 表达流行性乙型脑炎病毒(EEBV)的囊膜蛋白(E蛋白),制备该蛋白特异性兔抗血清,为建立诊断EEBV感染的检测方法奠定基础.方法 将pET32a-E质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)细胞,以终浓度为0.5 mmol·L-1的异丙基-β-D-硫代半乳糖苷于37℃下诱导蛋白表达8 h,在8 mol·L-1尿素变性条件下,采用镍离子金属螯合亲和层析法对重组E蛋白进行纯化.透析复性后,以E蛋白为免疫原免疫新西兰兔制备兔抗血清,采用Western blot、酶联免疫吸附试验和免疫荧光分析法检测免疫血清中EEBV特异性抗体.结果 成功表达了重组E蛋白,经纯化、复性后可从1 L培养物中获得23.8 mg具有生物活性的E蛋白,该蛋白能与抗EEBV单抗发生特异反应.免疫制备的兔抗血清能与E蛋白发生特异反应,抗体效价高达1×51200;兔抗血清能与EEBV感染的细胞发生特异反应.结论 成功表达了EEBV E蛋白并制备了特异性强、亲和力高的兔抗血清,为建立诊断EEBV感染的免疫学检测方法、有效防控流行性乙型脑炎奠定了基础.
文献关键词：
流行性乙型脑炎病毒;囊膜蛋白;原核表达;兔抗血清
中图分类号：
作者姓名：
徐飞;冯继伟;李鹏;孟玉娇;陈玉明;王龙康;王寅彪
作者机构：
新乡医学院公共卫生学院,河南 新乡 453003;新乡学院生命科学与基础医学学院,河南 新乡 453003
文献出处：
引用格式：
[1]徐飞;冯继伟;李鹏;孟玉娇;陈玉明;王龙康;王寅彪-.流行性乙型脑炎病毒SA14-14-2株囊膜蛋白的原核表达及其兔抗血清的制备)[J].新乡医学院学报,2022(02):101-105
A类：
EEBV
B类：
流行性乙型脑炎病毒,SA14,囊膜蛋白,原核表达,兔抗血清,pET32a,质粒,大肠杆菌,BL21,DE3,异丙基,半乳糖,糖苷,镍离子,子金,金属螯合,亲和层析,层析法,免疫原,新西兰兔,blot,酶联免疫吸附试验,免疫荧光分析,荧光分析法,免疫血清,特异性抗体,单抗,白发,抗体效价,价高,亲和力,免疫学检测方法,控流
AB值：
0.239549
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