典型文献
多靶点沉默SOST基因修饰MC3T3-E1细胞注射对小鼠椎体微结构的影响
文献摘要:
目的 利用多靶点SOST基因沉默技术修饰小鼠胚胎成骨细胞前体细胞MC3T3-E1,并将其注射到小鼠体内,观察其对小鼠椎体骨密度及微结构的影响.方法 取18只18月龄雌性C57BL/6小鼠在无菌条件下手术切除双侧卵巢制作骨质疏松模型,并分为3组(n=6):SOST基因沉默组注射采用多靶点SOST基因沉默技术修饰并同时转染CRISPR-sgRNA载体系统和SOST-RNAi修复模板载体假病毒颗粒的MC3T3-E1细胞;阴性组注射同时转染CRISPR-sgRNA载体系统和SOST-N修复模板载体假病毒颗粒的MC3T3-E1细胞;空白组注射不作任何处理的MC3T3-E1细胞.采用HE染色和Masson三色染色观察小鼠椎体骨小梁面积的变化,免疫组化染色观察骨组织中骨保护素(OPG)和RANKL表达的变化,实时荧光定量PCR检测观察各组细胞SOST及骨代谢相关细胞因子(RUNX2、β-catenin、RANKL、OPG)的表达变化.结果 L1 HE染色和L2 Masson三色染色结果 显示,SOST基因沉默组骨小梁面积大于阴性组和空白组,差异均有统计学意义(P<0.05).L2免疫组织化学染色结果 显示,SOST基因沉默组OPG表达量高于阴性组和空白组,RANKL表达量低于阴性组和空白组,差异均有统计学意义(P<0.05).L3实时荧光定量PCR检测结果 显示,SOST基因沉默组SOST和RANKL表达量低于阴性组,RUNX2、β-catenin和OPG表达量高于阴性组,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 多靶点沉默SOST基因修饰MC3T3-E1细胞尾静脉注射能够促进小鼠成骨细胞分化和分泌功能,抑制破骨细胞活性,有效改善小鼠椎体微结构.
文献关键词:
脊柱;骨质疏松;成骨细胞;细胞分化;细胞增殖;小鼠
中图分类号:
作者姓名:
苏军;赵明兴;李芳;林乃锴;孙长英;鲁世金
作者机构:
杭州市余杭区第一人民医院骨科,杭州 310000;长治医学院附属和平医院骨科,长治 046000;广西中医药大学附属瑞康医院中西医结合转化医学中心,南宁 530000
文献出处:
引用格式:
[1]苏军;赵明兴;李芳;林乃锴;孙长英;鲁世金-.多靶点沉默SOST基因修饰MC3T3-E1细胞注射对小鼠椎体微结构的影响)[J].脊柱外科杂志,2022(05):327-333
A类:
B类:
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AB值:
0.257676
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