目的 探讨蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊对糖尿病肾病(DN)肾小管上皮细胞自噬-溶酶体的影响与机制.方法 将24只大鼠腹腔单次注射链脲佐菌素(STZ)诱导SD大鼠高血糖模型后,随机分为模型组(DN)和治疗组(DN+蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊),用药24周;另外10只未诱导高血糖大鼠设为对照组.检测各组大鼠肾功能指标,取肾皮质行组织病理学检查,采用Western印迹检测大鼠分离肾小管的胶原蛋白-Ⅲ、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、转录因子EB(TFEB)、自噬泡标记蛋白LC3和自噬底物p62表达.将HK-2细胞分为牛血清白蛋白(Co-BSA)组、Co-BSA治疗组、糖基化终末产物-BSA(AGEs-BSA)组及AGEs-BSA-治疗组.Western印迹检测各组细胞p62、TFEB表达;以TFEB质粒转染HK-2细胞,通过RT-PCR检测过表达效率,观察各组HK-2细胞溶酶体红色荧光探针荧光强度,并检测各组细胞组织蛋白酶活性.结果 与对照组大鼠相比,模型组大鼠的血肌酐(Scr)、24h尿蛋白水平增高、LC3、p62、胶原蛋白-Ⅲ和α-SMA表达明显增多,而肾小球滤过率(GFR)、TFEB表达明显减少.与模型组大鼠相比,治疗组大鼠的Scr、24 h尿蛋白均明显降低,GFR明显升高,LC3、p62、胶原蛋白-Ⅲ和α-SMA表达明显减少,TFEB表达明显增多.在HK-2细胞中,TFEB和p62的表达情况与在大鼠肾组织中相似.与Co-BSA组相比,AGEs-BSA组的探针荧光强度和组织蛋白酶活性明显减弱;过表达TFEB后,AGEs-BSA组的荧光强度和组织蛋白酶活性均明显增强.结论 蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊对糖尿病肾小管上皮细胞可能具有上调TFEB表达、调节自噬-溶酶体通路的作用.

蝉花菌丝;海昆肾喜胶囊;糖尿病肾病;转录因子EB;自噬

贾英民;张术姣;耿运玲;曹梓静;王耀献;吕仁和;刘玉宁;刘伟敬

101300北京,北京中医医院顺义医院;100007北京,北京中医药大学东直门医院、肾病研究所

中华肾病研究电子杂志

[1]贾英民;张术姣;耿运玲;曹梓静;王耀献;吕仁和;刘玉宁;刘伟敬-.蝉花菌丝联合海昆肾喜胶囊对糖尿病肾小管上皮细胞自噬-溶酶体通路的影响)[J].中华肾病研究电子杂志,2022(04):212-218

蝉花菌丝

海昆肾喜胶囊,肾小管上皮细胞,细胞自噬,溶酶体,对糖尿病肾病,单次注射,链脲佐菌素,STZ,高血糖模型,DN+,导高,肾功能指标,肾皮质,组织病理学检查,胶原蛋白,平滑肌肌动蛋白,SMA,TFEB,LC3,底物,p62,HK,牛血清白蛋白,Co,BSA,糖基化终末产物,AGEs,质粒转染,过表达,表达效率,红色荧光,荧光探针,荧光强度,细胞组织,组织蛋白酶,蛋白酶活性,血肌酐,Scr,24h,尿蛋白,肾小球滤过率,GFR,肾组织,明显增强,节自

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