目的 探讨hsa_ cire_ 0067582在胃癌细胞中的表达水平及其对细胞增殖和侵袭能力的影响,并研究bsa_ circ_0067582在胃癌中的作用机制.方法 hsa_circ_0067582过表达(Oe-circ_0067582)质粒分别转染人胃癌AGS和SGC-7901细胞,CCK-8检测细胞活力情况,细胞克隆形成实验及EdU实验检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞侵袭能力;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测凋亡及上皮间质转换(EMT)相关蛋白的表达情况,并通过异种移植瘤实验观察Oe-circ_0067582对裸鼠体内SGC-7901细胞生长的影响.生物信息学方法预测hsa_circ_0067582结合的微小RNA(miR-NA),并构建竞争性内源RNA(ceRNA)调控网络;对miRNA靶基因进行功能学分析.结果 与pLO-ciR组相比,Oe-circ—0067582组的AGS和SGC-7901的细胞活力(t=7.883,P=0.001;t=5.679,P=0.005)、增殖(t=6.709,P=0.003;=5.857,P=0.003)及侵袭能力(t=7.782,P=0.002;t=6.342,P=0.003)均明显降低,并诱导细胞凋亡(t =7.225,P=0.002;t=11.509,P=0.001).Western blot结果显示,Oe-circ_ 0067582组的AGS和SGC-7901细胞半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase)3(t=6.863,P=0.002;t=7.024,P=0.001)、Caspase 7(t=3.295,P=0.04;t=6.008,P=0.004)、Caspase 9(t=4.408,P=0.012;t=6.278,P=0.004)和E-钙黏蛋白(t=12.453,P=0.002;t=10.867,P=0.001)蛋白表达水平均明显升高,而波形蛋白(=7.242,P=0.002;t=5.694,P=0.004)和N一钙黏蛋白(t =6.480,P=0.003;=7.446,P=0.001)蛋白表达水平明显降低.Oe-circ_0067582抑制SGC-7901荷瘤裸鼠体内肿瘤的生长(t=3.526,P=0.017).根据TargetScan及miRnada数据库获知hsa_ circ_ 0067582可竞争性地结合hsa-miR-181b-3 p、hsa-miR-337-3p、hsa-miR-421和hsa-miR-548d-3p.功能富集结果表明miRNA靶基因涉及癌症相关的多个生物学过程,包括细胞凋亡负调控、基因表达、癌症中的转录失调、转化生长因子-β、p53信号通路等.结论 Oe-circ_0067582抑制胃癌AGS和SGC-7901细胞增殖,并可能通过减弱EMT进程降低胃癌细胞侵袭能力,为胃癌的预防及治疗提供了新的靶点.

环状RNA;hsa_circ_0067582;胃癌;增殖;侵袭;AGS细胞;SGC-7901细胞

陆蓉丹;黄哲;陆佳敏;张海强;邵永富

宁波大学医学院附属医院消化内科,浙江宁波315020;宁波大学医学院附属医院急诊科,浙江宁波315020;宁波大学医学院附属医院胃肠外科,浙江宁波315020

中国医学科学院学报

[1]陆蓉丹;黄哲;陆佳敏;张海强;邵永富-.环状RNA hsa_circ_0067582对胃癌细胞增殖及侵袭能力的影响)[J].中国医学科学院学报,2022(01):81-90

cire,bsa,pLO,miRnada,548d

hsa,circ,胃癌细胞,细胞增殖和侵袭,过表达,Oe,质粒,转染,AGS,SGC,CCK,细胞活力,细胞克隆形成,EdU,实验检测,Transwell,细胞侵袭能力,流式细胞术,blot,上皮间质转换,EMT,异种移植,移植瘤,实验观察,细胞生长,生物信息学方法,ceRNA,调控网络,miRNA,靶基因,功能学分析,ciR,半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶,Caspase,钙黏蛋白,蛋白表达水平,波形蛋白,荷瘤裸鼠,TargetScan,获知,可竞争性,181b,3p,功能富集,集结,生物学过程,负调控,转录失调,转化生长因子,p53,癌细胞侵袭,预防及治疗

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