典型文献
适用于甲壳动物细胞的缓冲液配方优化
文献摘要：
目前,在对螯虾、对虾等甲壳动物细胞的研究中,广泛采用了适用于哺乳动物细胞或昆虫细胞的各类缓冲液和培养液.但是,甲壳动物体液的渗透压与哺乳动物等有很大差异,直接沿用哺乳动物等细胞的缓冲系统不合适.本研究首先测定了红螯螯虾(Cherax quadricarinatus)、克氏原螯虾(Procambarus clarkii),与饲养在盐度30海水中的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的血清渗透压,其值分别为(409±12)、(465±8)、(704±15)mOsmol/kg.随后,通过调节NaCl的浓度来改变抗凝剂和磷酸盐缓冲液(PBS)的渗透压,使其与相应动物的血清渗透压相等.优化后适用于红螯螯虾的抗凝剂和PBS中,NaCl的浓度分别为70、200 mmol/L;适用于克氏原螯虾的抗凝剂和PBS中,NaCl的浓度分别为100、230 mmol/L;适用于凡纳滨对虾的抗凝剂和PBS中,NaCl的浓度分别为220、360 mmol/L.进一步比较了3种动物的血细胞在不同渗透压缓冲液中的存活情况.结果表明,红螯螯虾、克氏原螯虾以及凡纳滨对虾这3种甲壳动物的血细胞在未优化的PBS中处理15 min,死亡率就分别达到4.5％、2.0％以及10.0％左右;然而当使用优化后的PBS进行处理时,死亡率则分别降至1.0％、1.0％以及2.0％左右.而血细胞在抗凝剂中的死亡率则较低(<2.0％),优化前后没有显著差异.综上,在甲壳动物活细胞实验中采用优化后的缓冲液,能改善细胞的状态,提高实验的准确性.
文献关键词：
海洋生物学;渗透压;抗凝剂;磷酸盐缓冲液;血细胞;甲壳动物
中图分类号：
作者姓名：
朱坤;李钫;杨丰
作者机构：
自然资源部第三海洋研究所、海洋生物遗传资源重点实验室,福建 厦门361005
文献出处：
引用格式：
[1]朱坤;李钫;杨丰-.适用于甲壳动物细胞的缓冲液配方优化)[J].应用海洋学学报,2022(04):683-692
A类：
mOsmol
B类：
甲壳动物,配方优化,哺乳动物细胞,昆虫细胞,培养液,动物体,体液,沿用,缓冲系统,先测,红螯螯虾,Cherax,quadricarinatus,克氏原螯虾,Procambarus,clarkii,饲养,盐度,凡纳滨对虾,Litopenaeus,vannamei,血清渗透压,NaCl,抗凝剂,磷酸盐缓冲液,PBS,相等,血细胞,存活情况,使用优化,活细胞,细胞实验,高实,海洋生物学
AB值：
0.281089
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