目的 探讨不同半夏炮制品体外抗肺纤维化的作用及筛选出的半夏制品对肺纤维化小鼠的干预作用.方法 用10μg/L转化生长因子β1(TGF-β1)诱导人胚肺成纤维细胞系(MRC-5)建立肺纤维化体外模型,经水提生半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)、清半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)、法半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)和姜半夏(2.1、4.2、8.4、16.7 g/L)分别处理48 h后,通过CCK-8法检测细胞活性、天狼星红染色法测定胶原含量进行抗纤维化筛选.用Western blot分析筛选出的生半夏干预MRC-5细胞表达α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的情况.C57BL/6N小鼠经口腔进行气管滴注博来霉素(2 mg/kg)建立肺纤维化模型,第14天开始灌胃生半夏水提液(2.5、5.0、10.0 g/kg),第28天取肺组织经HE和Masson染色观察,并测定羟脯氨酸(HYP)含量.结果 与对照组比较,TGF-β1诱导后的MRC-5细胞对生半夏(8.4 g/L)的细胞活性抑制作用更敏感(P<0.05),而未经TGF-β1诱导的MRC-5细胞则需要更高浓度的生半夏或清半夏(16.7 g/L)抑制细胞活性(P<0.05).与模型对照组比较,生半夏(8.4、16.7 g/L)能够抑制TGF-β1诱导的胶原合成(P<0.05),清半夏、法半夏、姜半夏各组未见抑制效应.与模型对照组比较,生半夏(2.1、4.2、8.4 g/L)能够抑制TGF-β1诱导的MRC-5细胞中 α-SMA蛋白的表达(P<0.05).生半夏(10 g/kg)能够缓解肺纤维化模型小鼠肺间质中的炎性浸润,恢复肺泡结构,减少胶原沉积,降低肺组织中的HYP含量(P<0.05).结论 生半夏对TGF-β1诱导后的病理性肌成纤维细胞具有活性抑制作用,并能阻止成纤维细胞向肌成纤维细胞分化,抑制其胶原合成,缓解模型小鼠的肺纤维化进展,为临床应用半夏治疗肺纤维化提供新的思路.

肺纤维化;半夏;肌成纤维细胞;胶原;MRC-5细胞系;C57BL/6N小鼠

贺双双;李彧;张彬彬;魏树全;申萌萌;林家伊;万熙;张澜;李天罡;史渊源;李亚东

北京中医药大学中医学院 北京100029;北京中医药大学生命科学学院;广州市第一人民医院呼吸与危重症医学科

北京中医药大学学报

[1]贺双双;李彧;张彬彬;魏树全;申萌萌;林家伊;万熙;张澜;李天罡;史渊源;李亚东-.不同半夏炮制品抗肺纤维化作用的体外筛选及体内评价)[J].北京中医药大学学报,2022(03):275-283

炮制品,体外筛选,体内评价,外抗,干预作用,转化生长因子,TGF,人胚肺成纤维细胞,细胞系,MRC,体外模型,经水,生半夏,法半夏,姜半夏,别处,CCK,细胞活性,天狼星,染色法,抗纤维化,blot,平滑肌肌动蛋白,SMA,C57BL,6N,经口,行气,气管滴注,博来霉素,肺纤维化模型,天开,灌胃,水提液,肺组织,HE,Masson,羟脯氨酸,HYP,胶原合成,抑制效应,模型小鼠,肺间质,肺泡,胶原沉积,病理性,肌成纤维细胞,成纤维细胞分化,解模

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