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典型文献
健骨方对破骨细胞形成和成骨细胞增殖分化的影响
文献摘要:
目的 探讨健骨方水提物对破骨细胞分化及成骨细胞增殖分化的影响.方法 制备健骨方水提物,通过MTT法测定药物对骨髓单核巨噬细胞(BMMs)细胞的毒性,采用核因子κB受体活化因子配体(RANKL)诱导BMMs分化形成破骨细胞,加入不同浓度药物进行干预,采用抗酒石酸酸性磷酸酶(TRACP)染色法测定破骨细胞分化抑制作用,采用Western Blot法测定RANKL诱导的NF-κB破骨细胞分化信号通路,运用RT-qPCR法测定信号通路下游破骨细胞分化关键基因NFATc1、C-FOS等的mRNA表达水平.以MC3T3-E1细胞作为前体成骨细胞,加入不同浓度药物进行干预,通过CCK8法测定细胞增殖能力、PNPP法检测碱性磷酸酶(ALP)活性、茜素红S染色法测定细胞矿化能力.结果 MTT法结果显示,健骨方细胞有毒性浓度大于500 μg/mL(P<0.05),破骨细胞分化抑制IC50为1.25 μg/mL.机制研究显示健骨方显著下调了RANKL-NF-κB信号通路中的p-P65、P53的蛋白表达(P<0.05),显著抑制了通路下游C-FOS、NFATc1等的mRNA表达水平(P<0.01,P<0.05).此外,成骨细胞活性检测显示,健骨方能明显促进MC3T3-E1细胞增殖、提高ALP活性及增加成骨细胞钙化的能力.结论 健骨方具有抑制破骨细胞分化和促进成骨前体细胞增殖、分化、矿化的药效作用.其作用与抑制破骨细胞分化RANKL-NF-κB信号
文献关键词:
健骨方;破骨细胞;成骨细胞;骨质疏松症;中医药
作者姓名:
许华珍;黄丹娥;郑柳怡;姚楠;蔡大可;甘海宁;黄雪君;胡子旋;赵自明;陈玉兴
作者机构:
广州中医药大学第五临床医学院,广东 广州510405;广东省第二中医院(广东省中医药工程技术研究院),广东 广州510095;广东省中医药研究开发重点实验室,广东 广州510095
引用格式:
[1]许华珍;黄丹娥;郑柳怡;姚楠;蔡大可;甘海宁;黄雪君;胡子旋;赵自明;陈玉兴-.健骨方对破骨细胞形成和成骨细胞增殖分化的影响)[J].中国骨质疏松杂志,2022(12):1728-1734
A类:
分化关键基因
B类:
健骨方,成骨细胞增殖,细胞增殖分化,方水,水提物,破骨细胞分化,MTT,单核巨噬细胞,BMMs,核因子,活化因子,RANKL,抗酒石酸酸性磷酸酶,TRACP,染色法,Blot,qPCR,路下,NFATc1,FOS,MC3T3,E1,CCK8,细胞增殖能力,PNPP,碱性磷酸酶,ALP,茜素红,细胞矿化,有毒,IC50,方显,P65,P53,骨细胞活性,活性检测,加成,钙化,促进成骨,成骨前体细胞,药效作用,骨质疏松症
AB值:
0.230561
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