目的 观察针刀对膝骨关节炎(KOA)兔膝关节软骨长链非编码RNA(lncRNA)/微小RNA(miRNA)/核因子κB(NF-κB)通路的影响,探讨针刀对KOA的软骨保护作用机制.方法 将新西兰兔随机分为空白对照组、模型组与针刀组,每组9只.采用Videman固定法建立KOA兔模型,造模后针刀组给予针刀干预,1次/周,连续3周.3周后各组取材膝关节软骨组织,运用HE染色观察软骨组织的病理学改变,扫描电镜观察软骨组织损伤情况.使用RT-qPCR法分析lncRNA小核仁RNA宿主基因1(lncRNA-SNHG1)、转化生长因子β激活的lncRNA(lncRNA-ATB)、miR-16-5p、miR-223-3p及环氧化酶2(COX-2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、NF-κB p65、核因子抑制蛋白 κB(IκBα)mRNA的表达;Western blotting分析NF-κB p65、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)、IκBα、磷酸化IκBα(p-IκBα)、COX-2、iNOS的蛋白表达;ELISA法测定IL-6、TNF-α的蛋白表达量.对lncRNA-SNHG1相对表达量与miR-16-5p相对表达量,lncRNA-ATB相对表达量与miR-223-3p相对表达量分别作相关性分析.结果 光学显微镜与扫描电镜观察表明,KOA兔软骨组织有明显损伤,针刀干预后损伤有一定程度的修复.与空白对照组比较,模型组膝关节软骨组织NF-κB p65、IκBα、COX-2、iNOS、IL-6、TNF-α 的mRNA表达水平及lncRNA-ATB、miR-16-5p表达水平升高(P<0.01),lncRNA-SNHG1、miR-223-3p表达水平降低(P<0.01);模型组p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα 值及COX-2、iNOS、IL-6、TNF-α 蛋白表达水平升高(P<0.01).与模型组比较,针刀组兔膝关节软骨组织IκBα、COX-2、iNOS、IL-6、NF-κB p65、TNF-αmRNA及lncRNA-ATB、miR-16-5p表达水平降低(P<0.05或P<0.01),lncRNA-SNHG1、miR-223-3p表达水平升高(P<0.01);针刀组p-NF-κB p65/NF-κB p65、p-IκBα/IκBα 值及COX-2、iNOS、IL-6、TNF-α的蛋白表达水平降低(P<0.01).lncRNA-SNHG1相对表达量与miR-16-5p相对表达量、lncRNA-ATB相对表达量与miR-223-3p相对表达量负相关(P<0.01).结论 针刀疗法保护KOA兔膝关节软骨的作用机制可能与lncRNA-SNHG1/miR-16-5p、lncRNATB/miR-223-3p通路共同影响NF-κB信号通路有关.

针刀;膝骨关节炎;长链非编码RNA;核因子κB;小核仁RNA宿主基因1;miR-16-5p;转化生长因子β;miR-223-3p;兔

安徽中医药大学 合肥 230038;安徽省中西医结合医院

[1]伍闲;宋小鸽;卢曼;夏帅;佘泽宇;卢梦雅;丁双;尚祥;耿凯;林秀华;杨永晖-.基于lncRNA/miRNA/NF-κB通路探讨针刀对膝骨关节炎兔的软骨保护作用机制)[J].北京中医药大学学报,2022(06):603-611

lncRNATB

miRNA,膝骨关节炎,骨保护,保护作用机制,KOA,膝关节软骨,长链非编码,核因子,新西兰兔,空白对照,Videman,兔模型,取材,关节软骨组织,HE,电镜观察,骨组织损伤,伤情,qPCR,核仁,宿主基因,SNHG1,转化生长因子,5p,3p,环氧化,COX,诱导型一氧化氮合酶,iNOS,p65,blotting,磷酸化,相对表达量,光学显微镜,平降,蛋白表达水平,针刀疗法

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