典型文献
双荧光标记小鼠肾脏足细胞的原代培养及鉴定
文献摘要：
目的:分离鼠肾脏肾小球并进行原代培养,进一步分选出足细胞,为足细胞相关疾病的研究提供新的技术支持.方法:将mTmG(+)小鼠与Cre(+)小鼠杂交后,获得基因型为mTmG(+)Cre(+)的子代.出生10～15d后取小鼠肾脏,通过差异过筛法分离肾小球,倒置相差显微镜观察分离的肾小球.用原代细胞培养基重悬肾小球,置于37℃5％CO2培养箱中培养,定期进行细胞换液和传代培养,倒置相差显微镜下观察细胞的形态与生长状况,倒置荧光显微镜下观察细胞的荧光种类及其比例,通过流式细胞术对足细胞进行计数与分选.结果:成功构建基因型为mTmG(+)Cre(+)小鼠,使用差异过筛法可分离出肾小球,在倒置相差显微镜下可观察到分离的肾小球,倒置荧光显微镜下可见带有绿色荧光的足细胞和带有红色荧光的非肾小球足细胞,流式细胞术可分选出呈现绿色荧光的足细胞,进行细胞计数,并收集分选后的足细胞.结论:使用mTmG(+)小鼠与Cre(+)小鼠进行杂交,获得足细胞表达特异性荧光的小鼠,通过差异过筛法、原代细胞培养、流式细胞术分选等一系列技术,可有效分离出小鼠肾脏足细胞.
文献关键词：
足细胞;肾小球;原代培养;鉴定
中图分类号：
作者姓名：
陈朝威;冯俊;胡继佳;朱子敬;梁伟
作者机构：
武汉大学人民医院肾内科 湖北 武汉 430060
文献出处：
引用格式：
[1]陈朝威;冯俊;胡继佳;朱子敬;梁伟-.双荧光标记小鼠肾脏足细胞的原代培养及鉴定)[J].武汉大学学报（医学版）,2022(06):902-907
A类：
mTmG
B类：
双荧光,荧光标记,小鼠肾脏足细胞,原代培养,分选,相关疾病,Cre,基因型,子代,15d,过筛,筛法,倒置,相差显微镜,原代细胞培养,培养箱,传代培养,显微镜下,生长状况,荧光显微镜,过流,流式细胞术,可分离,红色荧光,肾小球足细胞,达特,有效分离
AB值：
0.185
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