典型文献
农杆菌介导的MsDUF基因转化紫花苜蓿的遗传转化体系建立及优化
文献摘要：
为建立适宜MsDUF基因转化紫花苜蓿的遗传转化体系,本试验在已知的紫花苜蓿再生体系的基础上,采用农杆菌介导法,以保定紫花苜蓿(Medicago sativa L.cv.Baoding)下胚轴和子叶为转化受体,将MsDUF基因导入到紫花苜蓿中,通过对愈伤诱导、分化及生根培养阶段抗生素浓度的筛选建立了优化的遗传转化体系,同时对筛选获得的转基因紫花苜蓿进行PCR和RT-PCR检测.结果表明,农杆菌介导的MsDUF基因遗传转化的最佳条件为:将预培养2 d的紫花苜蓿下胚轴用含pCAMBIA1301-MsDUF质粒的农杆菌菌液(OD600为0.3～0.5)侵染10 min,共培养暗处理2 d后转入含30 mg/L Hyg和500 mg/L Cef的愈伤诱导培养基和分化培养基上诱导分化,待抗性芽长到2～3 cm高时转入含30 mg/L Hyg和300 mg/L Cef的生根培养基上,得到6株经PCR检测为阳性的抗性植株;选取5株进行RT-PCR检测,均检测出大小与目的条带相吻合的清晰条带,证明MsDUF基因已成功转入保定紫花苜蓿中.本试验成功建立了农杆菌介导的高效MsDUF基因转化紫花苜蓿的遗传转化体系,为进一步研究MsDUF基因功能奠定了基础,同时为紫花苜蓿育种和种质创新提供了基础材料.
文献关键词：
紫花苜蓿;MsDUF基因;农杆菌介导;遗传转化体系;PCR检测;RT-PCR检测
中图分类号：
作者姓名：
安明珠;马向丽;周凯;段新慧;姜华;韩博
作者机构：
云南农业大学动物科技学院,云南 昆明 650201
文献出处：
引用格式：
[1]安明珠;马向丽;周凯;段新慧;姜华;韩博-.农杆菌介导的MsDUF基因转化紫花苜蓿的遗传转化体系建立及优化)[J].山东农业科学,2022(03):22-27
A类：
MsDUF,Baoding,Cef
B类：
紫花苜蓿,遗传转化体系,体系建立,再生体系,农杆菌介导法,保定,Medicago,sativa,cv,下胚轴,子叶,导入到,愈伤诱导,转基因,基因遗传,最佳条件,预培养,pCAMBIA1301,质粒,菌液,OD600,侵染,共培养,暗处,转入,Hyg,诱导培养基,分化培养,诱导分化,生根培养基,植株,条带,相吻合,入保,基因功能,育种,种质创新
AB值：
0.232504
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
