首站-论文投稿智能助手
典型文献
绵羊附睾GPX5的抗氧化功能研究
文献摘要:
[目的]利用体外培养的绵羊附睾上皮细胞(EECs)探究谷胱甘肽过氧化物酶5(GPX5)的抗氧化功能.[方法]体外分离培养并鉴定绵羊EECs后备用.筛选合成3条GPX5的siRNA序列(siRNA-N.1、siRNA-N.2、siRNA-N.3),同时随机设计一段不与GPX5重合的扰码(scramble)序列(siRNA-NC),采用瞬时转染法转染EECs,以正常的EECs为对照(CK),于转染34 h后取样,从mRNA和蛋白水平检测GPX5的干扰效果.采用CCK-8法检测GPX5干扰组、siRNA-NC组和CK组EECs的增殖能力,采用DCFH-DA探针法检测其活性氧(ROS)水平,采用TBA法检测其丙二醛(MDA)水平,采用免疫荧光法检测其8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)水平.[结果]分离培养的细胞可与角蛋白18(CK18)特异性抗体反应,表明细胞为EECs,可用于后续试验.siRNA-N.3(即siRNA-GPX5)对EECs GPX5 mRNA和蛋白表达的干扰效果最优,可用于后续试验.随着过氧化氢(H2O2)处理浓度的增加,与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs的增殖能力持续下降.与CK组相比,siRNA-GPX5组EECs中的ROS和MDA水平分别极显著(P<0.01)和显著(P<0.05)升高,8-OHdG水平明显上升.[结论]GPX5可以有效保护绵羊EECs,使其免受脂质过氧化损伤及DNA氧化损伤.
文献关键词:
绵羊;附睾上皮细胞;谷胱甘肽过氧化物酶5(GPX5);抗氧化能力
作者姓名:
栾兆进;赵勇超;宋慧子;张家新
作者机构:
内蒙古农业大学动物科学学院/内蒙古自治区动物遗传育种与繁殖重点实验室,内蒙古呼和浩特010018;包头医学院基础医学与法医学院,内蒙古包头014040
引用格式:
[1]栾兆进;赵勇超;宋慧子;张家新-.绵羊附睾GPX5的抗氧化功能研究)[J].西北农林科技大学学报(自然科学版),2022(08):8-14,26
A类:
GPX5
B类:
绵羊,抗氧化功能,功能研究,体外培养,附睾上皮细胞,EECs,谷胱甘肽过氧化物酶,外分,分离培养,后备,备用,siRNA,随机设计,scramble,NC,转染,水平检测,干扰效果,CCK,DCFH,探针法,ROS,TBA,免疫荧光法,脱氧鸟苷,OHdG,角蛋白,CK18,特异性抗体,抗体反应,明细,H2O2,力持,免受,脂质过氧化,过氧化损伤,伤及,抗氧化能力
AB值:
0.243876
相似文献
机标中图分类号,由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成,仅供学习研究参考。