典型文献
罗汉果2个氧化鲨烯环化酶基因克隆及功能表征
文献摘要：
氧化角鲨烯环化酶(oxidosqualene cyclase,OSC)属于多基因家族,可以将常见的前体2,3-氧化角鲨烯转化为各种类型的三萜骨架.该研究根据罗汉果转录组数据分析设计引物,克隆得到2条罗汉果OSC基因SgAS1(GenBank No.QD067189.1)和 SgAS2(GenBank No.QD067190.1).SgAS1 的开放阅读框(open reading frame,ORF)为 2 262 bp,编码754个氨基酸,SgAS2的ORF为2 289 bp,编码762个氨基酸.实时荧光定量PCR结果显示2条SgOSCs基因在茎、叶和果实的不同时期表现出不同的表达模式.系统发育分析表明,SgAS1和SgAS2都与β-香树脂醇合酶聚为一支,但进一步利用酵母异源表达进行功能表征发现SgAS1没有活性,SgAS2能产生β-香树脂醇作为唯一产物.多重序列比对表明,SgAS2具有与β-香树脂醇生物合成相关的保守MWCYCR序列,而SgAS1有一个不寻常的LFCYTR序列,对此作者进行了定点突变分析该序列并发现色氨酸残基(W)为影响SgOSCs功能的关键氨基酸残基.此外,作者将单功能β-amyrin合酶SgAS2导入课题组前期改造的底盘菌株GH1中,将β-amyrin的产量提高至44.05 mg·L-1.该研究首次报道了来自罗汉果中的单功能β-amyrin合酶SgAS2并对其进行了定点突变和合成生物学研究,为三萜化合物的定向生物合成提供了宝贵的资源.
文献关键词：
罗汉果;氧化角鲨烯环化酶;功能鉴定;三萜骨架;保守序列
中图分类号：
作者姓名：
高海云;高龙龙;刘远;赵欢;高伟
作者机构：
首都医科大学中医药学院,北京100069;首都医科大学北京世纪坛医院,北京100038
文献出处：
引用格式：
[1]高海云;高龙龙;刘远;赵欢;高伟-.罗汉果2个氧化鲨烯环化酶基因克隆及功能表征)[J].中国中药杂志,2022(22):6050-6057
A类：
氧化角鲨烯环化酶,三萜骨架,SgAS1,QD067189,SgAS2,QD067190,SgOSCs,MWCYCR,LFCYTR,amyrin
B类：
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AB值：
0.252249
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