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大鼠CaM(nNOS)-pGEX-4T-1原核表达载体构建及蛋白表达
文献摘要：
构建CaM(nNOS)-pGEX-4T-1原核表达载体,转化于大肠杆菌BL-21细胞,并诱导蛋白的表达.以全长nNOS-pME18S重组体为模板,采用PCR扩增目的基因,克隆入原核表达载体pGEX-4T-1;将重组成功的重组子CaM(nNOS)-pGEX-4T-1转化入BL-21细胞,加入诱导剂IPTG诱导CaM(nNOS)蛋白的表达,用SDS-PAGE及免疫印迹方法鉴定CaM(nNOS)的表达.CaM(nNOS)-pGEX-4T-1表达载体成功构建.在诱导温度为16℃,IPTG为0.5mmol/L条件下,诱导时间为20h,可在大肠杆菌中大量表达CaM.重组CaM(nNOS)-pGEX-4T-1原核表达载体成功构建,蛋白表达成功.
文献关键词：
钙调素结合区;原核表达载体;蛋白诱导表达;神经型一氧化氮合酶
中图分类号：
作者姓名：
孟利;杜彩萍
作者机构：
徐州医科大学,江苏省脑病生物信息重点实验室,生物化学与分子生物学研究中心,江苏徐州 221004
文献出处：
引用格式：
[1]孟利;杜彩萍-.大鼠CaM(nNOS)-pGEX-4T-1原核表达载体构建及蛋白表达)[J].中国科技纵横,2022(24):123-125
A类：
pME18S,钙调素结合区
B类：
CaM,nNOS,pGEX,4T,原核表达载体,表达载体构建,大肠杆菌,BL,全长,重组体,目的基因,入原,化入,诱导剂,IPTG,SDS,PAGE,免疫印迹,5mmol,诱导时间,20h,蛋白诱导表达,神经型一氧化氮合酶
AB值：
0.239884
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