典型文献
羽衣甘蓝BoMAPK4原核表达、抗体制备及蛋白表达分析
文献摘要：
以羽衣甘蓝(Brassica oleracea var.acephala)自交不亲和系(S13-bS13-b)为材料,提取柱头RNA,利用RT-PCR分离羽衣甘蓝柱头丝裂原活化蛋白激酶4(MAPK4)基因.结果表明:获得的BoMAPK4 cDNA含有一个1122 bp开放阅读框,编码373个氨基酸,具有丝氨酸/苏氨酸结构域,无信号肽和跨膜结构.羽衣甘蓝BoMAPK4与油菜(B.napus)BnMAPK4、芜菁(B.rapa)BrMAPK4、拟南芥(Arabidopsis thaliana)AtMAPK4的氨基酸序列一致性分别为99.7％、99.5％、95.4％.将BoMAPK4编码区的序列构建到原核表达载体pET-14b上,并转化到BL21(DE3)大肠杆菌(Escherichia coli)中进行原核表达.SDS-PAGE结果显示,在分子量大小约45 kDa处有BoMAPK4重组蛋白特异性表达.利用亲和层析的方法获得高纯度的重组BoMAPK4蛋白.利用获得的重组BoMAPK4蛋白免疫小鼠,制备BoMAPK4的多克隆抗体.提取羽衣甘蓝萼片、花瓣、花药、柱头、花柱和子房的总蛋白,利用免疫印迹的方法进行蛋白表达检测,结果发现BoMAPK4在花瓣、花药和子房中表达的较少,在萼片和花柱中表达的较多,在柱头中的表达量最高.这些研究为探讨BoMAPK4的生物学功能奠定了基础.
文献关键词：
羽衣甘蓝;柱头;丝裂原活化蛋白激酶4;多克隆抗体;免疫印迹
中图分类号：
作者姓名：
栗赫铭;秦洪涛;魏德强;李旭;蓝兴国
作者机构：
东北盐碱植被恢复与重建教育部重点实验室,东北林业大学,哈尔滨 150040
文献出处：
引用格式：
[1]栗赫铭;秦洪涛;魏德强;李旭;蓝兴国-.羽衣甘蓝BoMAPK4原核表达、抗体制备及蛋白表达分析)[J].植物研究,2022(04):584-591
A类：
BoMAPK4,bS13,MAPK4,BnMAPK4,BrMAPK4,AtMAPK4
B类：
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AB值：
0.337511
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