目的 研究六价铬对雄激素受体(AR)转录活性的影响及其与小泛素类似修饰物特异性蛋白酶(SENP)家族分子的相关性.方法 ①293T细胞经K2CrO40.25,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0和16.0μmol·L-1处理24 h,LNCaP细胞经K2CrO40.25,0.5,1.0,2.0,4.0,10.0和20.0μmol·L-1处理24 h,用MTT法检测细胞存活率并计算半数抑制浓度(IC50)值;②将带有荧光素酶报告基因的表达雄激素反应元件的质粒和表达AR的质粒共转染293T细胞,将带有荧光素酶报告基因的表达雄激素反应元件的质粒转染LNCaP细胞,分别用K2CrO40.25,0.5,1.0,2.0,4.0,8.0和16.0μmol·L-1处理24 h,用双荧光素酶报告基因检测系统分析外源性和内源性AR的转录活性.③取对数生长期LNCaP细胞,以K2CrO40.5,2.0和8.0μmol·L-1处理24 h,用逆转录PCR法检测AR和SENP家族分子SENP1,SENP2,SENP3,SENP5,SENP6,SENP7和SENP8 mRNA水平,Western印迹法检测AR,SENP1和SENP3蛋白水平.结果 ①与细胞对照组相比,K2CrO4浓度≥1.0μmol·L-1时293T细胞存活率显著降低(P<0.01),K2CrO4浓度≥2.0μmol·L-1时LNCaP细胞存活率明显降低(P<0.01).②与细胞对照组相比,K2CrO4浓度≥1.0μmol·L-1时293T细胞中外源性AR的转录活性显著增强(P<0.05),K2CrO44.0和8.0μmol·L-1明显增强LNCaP细胞中内源性AR转录活性(P<0.05).③与细胞对照组相比,K2CrO40.5,2.0和8.0μmol·L-1均不改变LNCaP细胞中AR mRNA和蛋白水平,而K2CrO42.0和8.0μmol·L-1组SENP1 mRNA水平显著增加(P<0.05),K2CrO40.5,2.0和8.0μmol·L-1组SENP3 mRNA水平显著增加(P<0.05).与细胞对照组相比,K2CrO48.0μmol·L-1组SENP1蛋白水平显著增加(P<0.01),K2CrO42.0和8.0μmol·L-1组SENP3蛋白水平显著增加(P<0.05).结论 K2CrO4可能通过上调SENP1和SENP3表达而增强AR转录活性.

六价铬;293T细胞;LNCaP细胞;雄激素受体;SUMO特异性蛋白酶

颜志文;王鹏敏;武瑞琴;陈方

厦门大学附属第一医院药剂科,福建 厦门 361003;中国人民解放军疾病预防控制中心,北京 100071

中国药理学与毒理学杂志

[1]颜志文;王鹏敏;武瑞琴;陈方-.六价铬通过上调SUMO特异性蛋白酶家族分子表达增强雄激素受体的转录活性)[J].中国药理学与毒理学杂志,2022(12):919-926

SENP,K2CrO40,SENP2,SENP6,SENP7,SENP8,K2CrO44,K2CrO42,K2CrO48

六价铬,SUMO,雄激素受体,转录活性,泛素,饰物,293T,LNCaP,MTT,细胞存活率,半数抑制浓度,IC50,反应元件,共转染,质粒转染,双荧光素酶报告基因,基因检测,外源性,内源性,对数生长期,逆转录,SENP1,SENP3,SENP5,明显增强

0.13496