目的:为促进麦胚的高值化利用,建立H2O2诱导的成骨细胞(osteoblast,OB)-破骨细胞(osteoclast,OC)共育体系氧化应激模型,探究麦胚源活性肽ADWGGPLPH对OB和OC活性的影响.方法:利用流式细胞术、噻唑蓝(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide,MTT)增殖实验、异硫氰酸荧光素(fluorescein isothiocyanate,FITC)/碘化丙啶(propidium iodide,PI)双染等方法,明确麦胚源活性肽对氧化应激环境中OB增殖和凋亡的作用.利用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活力检测、酶联免疫吸附测定以及抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase,TRAP)染色等方法研究麦胚源活性肽对氧化应激共育体系中OB和OC分化活性的影响.结果:麦胚源活性肽能够有效抑制氧化应激共育体系中OB内活性氧的增加,并通过抑制丙二醛生成,增强谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活力,提高OB免受自由基攻击以及清除自由基的能力.麦胚源活性肽可显著抑制氧化应激共育体系中OB凋亡(F1TC/PI双染结果显示OB凋亡率由12.4％下调至5.3％,OB细胞活力由60.4％提高至92.8％(P＜0.01)),改善了OB增殖水平.此外,麦胚源活性肽对OB早期分化活性指标ALP活力、蛋白I型胶原以及晚期分化活性指标骨钙素水平的下降具有良好改善作用,OB矿化率从21.3％提高至84.3％(P＜0.01),从而使OB发挥良好的分化活性和矿化功能.TRAP染色结果显示麦胚源活性肽也能有效抑制氧化应激造成的OC过度分化(OC相对阳性面积从376.4％减小至128.1％(P＜0.01)).结论:麦胚源活性肽对H2O2诱导的OB-OC共育体系中细胞氧化损伤具有保护作用,从而维持良好的细胞稳态,本实验可为麦胚蛋白的开发利用提供一定的理论参考.

麦胚肽;细胞氧化损伤;成骨-破骨细胞共育体系;细胞稳态

罗涛;李宇;汪芳;翁泽斌;熊玲;宋海昭;王銮凤;沈新春

南京财经大学食品科学与工程学院,江苏省现代粮食流通与安全协同创新中心,江苏高校粮油质量安全控制及深加工重点实验室,江苏南京 210023;南京中医药大学中医学院·中西医结合学院,江苏南京 210000

食品科学

[1]罗涛;李宇;汪芳;翁泽斌;熊玲;宋海昭;王銮凤;沈新春-.麦胚源活性肽对H2O2诱导的成骨细胞,破骨细胞共育体系中细胞氧化损伤的保护作用)[J].食品科学,2022(21):126-136

ADWGGPLPH,F1TC,麦胚肽

活性肽,H2O2,成骨细胞,破骨细胞,细胞共育,细胞氧化损伤,高值化利用,osteoblast,OB,osteoclast,OC,流式细胞术,噻唑蓝,dimethylthiazol,diphenyl,2H,tetrazolium,bromide,MTT,异硫氰酸荧光素,fluorescein,isothiocyanate,FITC,碘化丙啶,propidium,iodide,增殖和凋亡,碱性磷酸酶,alkaline,phosphatase,ALP,酶联免疫吸附测定,抗酒石酸酸性磷酸酶,tartrate,resistant,acid,TRAP,抑制氧化,谷胱甘肽过氧化物酶,酶活力,免受,清除自由基,凋亡率,调至,细胞活力,活性指标,原以,骨钙素水平,矿化率,染色结果,细胞稳态,胚蛋

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