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神经肽S对大鼠鼻黏膜间充质干细胞成骨及分化相关蛋白影响的实验研究
文献摘要：
目的:探讨脑源性神经肽S(NPS)对大鼠鼻黏膜间充质干细胞(EMSCs)成骨及分化蛋白的影响。方法:取6周龄的雌性SD大鼠鼻黏膜行EMSCs培养，选用第4代EMSCs行相关实验。采用免疫荧光法检测EMSCs的表面标志物Nestin和Vimentin鉴定EMSCs。加入NPS与EMSCs共培养，并将EMSCs分为生理盐水组(对照组)、200 ng/ml NPS组、400 ng/ml NPS组。采用免疫荧光染色法观察NPS作用8 h后EMSCs的表达量，评估NPS对EMSCs增殖的影响。将EMSCs在成骨诱导培养基培养14 d，用以观察NPS对EMSCs成骨分化的影响：采用碱性磷酸酶(ALP)试剂盒检测ALP的活性；采用茜素红S(ARS)染色法观察矿化水平；采用蛋白质免疫印迹法和免疫荧光染色法检测骨桥蛋白(OPN)、骨钙素(OCN)、胶原蛋白Ⅰ(COL Ⅰ)、NPS受体(NPSR)及Runx-2的表达水平。结果:免疫荧光染色结果显示，鼻黏膜分离培养的细胞的Nestin和Vimentin均为阳性表达。免疫荧光结果表明，对照组、200 ng/ml NPS组及400 ng/ml NPS组Ki-67的阳性表达率差异无统计学意义(
P>0.05)。ALP活性检测及ARS染色结果显示，200 ng/ml NPS组与400 ng/ml NPS组的ALP活性及钙结节表达量差异均无统计学意义(均
P>0.05)，但均高于对照组(均
P < 0.01)；蛋白质免疫印迹结果显示，200 ng/ml NPS组和400 ng/ml NPS组的NPSR、Runx-2、COL Ⅰ及OPN的表达量均高于对照组(均
P<0.05)，200 ng/ml NPS组与400 ng/ml NPS组上述蛋白的表达量差异均无统计学意义(均
P>0.05)。免疫荧光染色结果显示，与对照组比较，400 ng/ml NPS组的OCN、COL Ⅰ、OPN、Runx-2的阳性表达率均显著增高，与蛋白质免疫印迹检测方法结果一致。
结论:NPS可促进EMSCs向成骨细胞分化，其机制可能与激活NPSR，促进Runx-2的表达、启动成骨分化进程、增加成骨相关蛋白的表达水平有关。
文献关键词：
神经肽S;鼻黏膜;间质干细胞;大鼠;体外研究;成骨分化
中图分类号：
作者姓名：
周艳君;孟朋飞;崔萌;史文涛;鲁晓杰;赵鹏
作者机构：
江南大学附属医院神经外科，江南大学神经医学研究中心，无锡 214122
文献出处：
引用格式：
[1]周艳君;孟朋飞;崔萌;史文涛;鲁晓杰;赵鹏-.神经肽S对大鼠鼻黏膜间充质干细胞成骨及分化相关蛋白影响的实验研究)[J].中华神经外科杂志,2022(11):1156-1162
A类：
鼻黏膜间充质干细胞,EMSCs,NPSR
B类：
神经肽,白影,周龄,雌性,免疫荧光法,表面标志物,Nestin,Vimentin,共培养,生理盐水,ml,免疫荧光染色法,成骨诱导,诱导培养基,成骨分化,碱性磷酸酶,ALP,试剂盒,茜素红,ARS,矿化,蛋白质免疫印迹,免疫印迹法,骨桥蛋白,OPN,骨钙素,OCN,胶原蛋白,COL,Runx,染色结果,膜分离,分离培养,Ki,阳性表达率,活性检测,成骨细胞分化,加成,骨相,间质干细胞,体外研究
AB值：
0.167236
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