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装载微RNA-132的间充质干细胞来源外泌体在缺氧条件下对人脐静脉内皮细胞功能的影响
文献摘要:
目的 探讨装载miRNA-132的间充质干细胞外泌体在缺氧环境中对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的保护作用及其机制.方法 通过电转法分别将miRNA-132阴性对照(NC)和miRNA-132 mimics转入间充质干细胞来源的外泌体中,即为对照外泌体(Exo)和装载miRNA-132的外泌体(miRNA-132 Exo).在低氧培养箱中,分别用等体积的PBS、Exo和miRNA-132 Exo与HUVEC共培养48 h.利用CCK-8法检测各组细胞增殖能力,采用管样形成实验检测细胞成管能力,利用Transwell迁移实验检测细胞迁移能力.通过TargetScan数据库预测miRNA-132的下游靶基因,并通过双萤光素酶报告基因实验、qPCR和蛋白质印迹法进行验证.结果 电转法成功将miRNA-132 mimics转入外泌体中.在缺氧条件下培养48 h后,Exo组与miRNA-132 Exo组HUVEC的增殖能力、成管能力和迁移能力均优于PBS组(P均<0.05),并且miRNA-132 Exo组HUVEC的增殖能力、成管能力和迁移能力均优于Exo组(P均<0.01).经TargetScan数据库筛选发现Ras p21蛋白活化子1(RASA1)可能为miRNA-132的靶点并与血管形成过程有关.双萤光素酶报告基因实验证实RASA1是miRNA-132的靶点,qPCR和蛋白质印迹法结果显示缺氧条件下加miRNA-132 Exo处理能抑制HUVEC中RASA1的表达.结论 无论是否装载miRNA-132,间充质干细胞来源的外泌体均可在缺氧环境中保护HUVEC的增殖能力、成管能力和迁移能力,miRNA-132可能通过抑制RASA1的表达增强了这种保护作用.
文献关键词:
微RNA-132;外泌体;人脐静脉内皮细胞;间充质干细胞;缺氧;细胞增殖;细胞迁移;新生血管形成
中图分类号:
作者姓名:
王天保;杜健峰;徐立庆
作者机构:
沈阳市第四人民医院心血管内科,沈阳 110000
文献出处:
引用格式:
[1]王天保;杜健峰;徐立庆-.装载微RNA-132的间充质干细胞来源外泌体在缺氧条件下对人脐静脉内皮细胞功能的影响)[J].海军军医大学学报,2022(03):278-285
A类:
B类:
装载,间充质干细胞来源外泌体,缺氧条件,人脐静脉内皮细胞,内皮细胞功能,miRNA,间充质干细胞外泌体,缺氧环境,HUVEC,转法,NC,mimics,转入,即为,Exo,低氧,培养箱,PBS,共培养,CCK,细胞增殖能力,实验检测,细胞成管能力,Transwell,迁移实验,细胞迁移能力,TargetScan,靶基因,萤光,报告基因,qPCR,蛋白质印迹法,Ras,p21,白活,化子,RASA1,新生血管形成
AB值:
0.228099
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