典型文献
黑曲霉转化系统的优化及重组菌株高效筛选
文献摘要：
黑曲霉(Aspergillus niger)是食品工业中重要的生产菌株,广泛应用于酶和有机酸生产.为提高黑曲霉遗传操作效率,对黑曲霉转化及重组菌株筛选策略进行优化.基于已报道的最佳转化条件对黑曲霉AG11进行电转化、农杆菌介导和聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)介导转化(Agrobacterium-mediated and PEG-mediated transformation,PMT),单个潮霉素转化板分别得到0、30和6个转化子.其中,PMT的转化子阳性率最高.基于优化后的原生质体制备条件:0.8～1 g松散的菌丝球于10 mL Yatalase溶液(0.8 mg/mL,pH 5.5)反应2.5 h,获得原生质体并进行PMT,转化效率较优化前提高14倍.为提高转化子筛选效率,将融合绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的天冬酰胺酶(asparaginase,ASN)基因整合至黑曲霉AG11糖化酶位点,并通过流式细胞仪分选表达ASN的孢子.分选结果显示,0.3％的孢子能表达GFP(共筛选30万个孢子).酶活力分析表明,65％表达GFP的孢子能表达ASN.研究结果将为黑曲霉基因编辑提供重要方法学基础.
文献关键词：
黑曲霉;PEG介导转化;原生质体;流式细胞仪;绿色荧光蛋白;天冬酰胺酶
中图分类号：
作者姓名：
李岑;刘松;堵国成
作者机构：
粮食发酵工艺与技术国家工程实验室(江南大学),江苏 无锡,214122;江南大学 生物工程学院,江苏 无锡,214122
文献出处：
引用格式：
[1]李岑;刘松;堵国成-.黑曲霉转化系统的优化及重组菌株高效筛选)[J].食品与发酵工业,2022(03):1-8
A类：
AG11,Yatalase
B类：
黑曲霉,转化系统,重组菌株,株高,高效筛选,Aspergillus,niger,食品工业,有机酸,遗传操作,操作效率,菌株筛选,筛选策略,转化条件,电转化,农杆菌介导,聚乙二醇,polyethylene,glycol,PEG,Agrobacterium,mediated,transformation,PMT,潮霉素,转化子,原生质体,制备条件,菌丝球,转化效率,筛选效率,绿色荧光蛋白,green,fluorescent,protein,GFP,天冬酰胺酶,asparaginase,ASN,基因整合,糖化酶,过流,流式细胞仪,分选,孢子,万个,酶活力,活力分析,基因编辑,方法学
AB值：
0.390325
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
