目的:探讨N-乙酰半胱氨酸(N-acetylcysteine，NAC)对衣霉素(Tunicamycin，Tm)诱导的脑微血管内皮细胞内质网应激及氧化应激的影响及其机制。方法:体外培养小鼠源性脑微血管内皮细胞，根据不同干预方式分为Control组(细胞正常培养)、TM组(5 μg/mL的Tm培养24 h)、NAC+TM组(1 mmol/L NAC预处理1 h，5 μg/mL Tm继续培养24 h)和NAC组(1 mmol/L NAC培养24 h)。CCK-8和FITC-Annexin V/PI检测细胞存活率和凋亡率，Western blot检测GRP78、CHOP、p-eNOS及caspase-12蛋白表达量，激光共聚焦检测ROS表达，比色法检测MDA浓度及SOD活力。采用SPSS 19.0进行统计分析，多组间比较采用单因素方差分析，进一步两两比较采用LSD- t检验。 结果:四组细胞的凋亡率和存活率差异有统计学意义( F＝62.57，35.00，均 P<0.05)。TM组细胞凋亡率[(25.49±1.55)%]高于Control组[(13.76±1.48)%]( P<0.01)，NAC+TM组细胞凋亡率[(17.65±1.00)%]高于TM组( P<0.01)。TM组细胞存活率[(66.33±5.69)%]低于Control组[(100.00±2.12)%]( P<0.01)，NAC+TM组细胞存活率[(85.67±4.04)%]高于TM组( P<0.05)。Western blot结果显示，四组细胞GRP78、CHOP及p-eNOS蛋白表达水平均差异有统计学意义( F＝32.39，68.66，13.12，均 P<0.01)。TM组GRP78、CHOP蛋白水平均高于Control组(均 P<0.01)，而p-eNOS水平低于Control组( P<0.01)。NAC+TM组GRP78、CHOP蛋白水平均低于TM组(均 P<0.01)，而p-eNOS水平则高于TM组( P<0.01)。四组细胞caspase-12蛋白表达水平差异无统计学意义( F＝0.33， P>0.05)。激光共聚焦显示，四组细胞ROS平均荧光强度差异有统计学意义( F＝77.66， P<0.01)，TM组ROS平均荧光强度(32.67±1.53)高于Control组(12.67±2.08)和NAC+TM组(18.33±1.53)(均 P<0.01)。比色法结果显示，四组细胞SOD活性及MDA浓度均差异有统计学意义( F＝40.53，34.99，均 P<0.01)。TM组SOD活性[(41.60±1.53)U/mg]低于Control组[(65.39±4.60)U/mg]和NAC+TM组[(58.72±1.64)U/mg](均 P<0.01)。TM组MDA浓度[(2.27±0.11)μmol/mg]高于Control组[(1.39±0.13)μmol/mg]和NAC+TM组[(1.44±0.11)μmol/mg]( P<0.01)。 结论:NAC可以减轻Tm诱导的脑微血管内皮细胞凋亡，这可能与其抑制ERS/OS相关通路有关。

N-乙酰半胱氨酸;内质网应激;氧化应激;脑微血管内皮细胞;凋亡

贵州医科大学精神病与精神卫生学教研室，贵阳　550001;贵州医科大学附属医院精神科，贵阳　550001

[1]李洁;杨丽霞;李佩璠;王艺明-.N-乙酰半胱氨酸对脑微血管内皮细胞内质网应激及氧化应激的影响)[J].中华行为医学与脑科学杂志,2022(02):110-115

Tunicamycin,NAC+TM

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