典型文献
以IL-8为评价指标的THP-1细胞光致敏评价方法的确定和验证
文献摘要:
目的 确定并验证以白细胞介素-8(IL-8)作为评价指标的THP-1细胞光致敏体外评价方法.方法 将THP-1细胞与19种光致敏剂、4种光刺激剂、2种皮肤致敏剂、1种皮肤刺激剂和阴性受试物分别孵育24 h,在光照射(1.7 mW·cm-2,50 min)或避光处理后,细胞换液放入培养箱内继续培养5h.光刺激剂需在正式光照射前进行预照射(光照30 min,然后避光15 min)处理.用Luminex液相芯片检测技术测定细胞培养上清和细胞裂解液中IL-8和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量并统计分析,进一步确定评价光致敏的细胞因子指标,并进行方法验证.结果 与非照射组比较,13种光致敏剂均引起照射组THP-1细胞IL-8总含量显著增加(P<0.01),阿伏苯宗为非照射组的1148~2269倍,其余12种为非照射组的6.7~195.1倍;光刺激剂经光照射后也可引起细胞分泌IL-8显著增加(P<0.01),但经过预照射处理后,IL-8的含量相比直接照射组显著下降(P<0.01).未经光照射条件下,皮肤致敏剂即可引起THP-1细胞分泌IL-8比对照组显著增加(P<0.01),光照后IL-8含量虽也较非照射组显著增加(P<0.01),但增加的幅度小于皮肤致敏剂本身引起IL-8变化的幅度.在光照条件下,皮肤刺激剂、阴性受试物均可引起细胞分泌IL-8较非照射组显著性增加(P<0.05),但增加的幅度较小,与对照组相似.以上受试物引起光照前后细胞TNF-αt变化的幅度均与对照组相近.以IL-8为评价指标的THP-1细胞光致敏评价方法检测光致敏剂的准确性、特异性和灵敏度分别是77.8%、100.0%、68.4%,并且该方法具有良好的重复性.结论 确定了THP-1细胞光致敏评价方法的细胞因子标志物评价指标为IL-8,判定标准为:①UVA照射后THP-1细胞中IL-8含量比非照射组显著增加;②UVA照射组与非照射组IL-8含量比值≥6.5;③当上述两条均满足时,对受试物进行UVA预照射处理,预处理照射组IL-8的含量与直接照射组(未经预照射)相比无显著性差异,且预处理照射组与预处理非照射组IL-8含量比值≥6.5.
文献关键词:
光致敏;THP-1细胞;白细胞介素;肿瘤坏死因子-α;方法验证
中图分类号:
作者姓名:
董建欣;黄舒佳;王宇;孙旭;赵华琛;祝清芬;刘丽;李波
作者机构:
山东省食品药品检验研究院国家药品监督管理局仿制药研究与评价重点实验室,山东济南250101;中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心药物非临床安全评价研究北京市重点实验室,北京 100176;国家药品监督管理局药品审评中心,北京 100022
文献出处:
引用格式:
[1]董建欣;黄舒佳;王宇;孙旭;赵华琛;祝清芬;刘丽;李波-.以IL-8为评价指标的THP-1细胞光致敏评价方法的确定和验证)[J].药物评价研究,2022(01):10-19
A类:
光致敏
B类:
THP,体外评价方法,光刺激,刺激剂,种皮,皮肤致敏,皮肤刺激,孵育,mW,避光,光处理,放入,培养箱,箱内,5h,Luminex,液相芯片检测,细胞培养,养上,上清,定评,方法验证,光照条件,测光,判定标准,UVA,当上
AB值:
0.18064
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