典型文献
大鼠肺血管内皮细胞的原代培养及生物学行为比较研究
文献摘要：
目的:建立大鼠肺动脉内皮细胞(PAEC)、肺静脉内皮细胞(PVEC)以及肺微血管内皮细胞(PMVEC)的体外分离和培养方法，分析3种肺血管内皮细胞的生物学特征及功能。方法:本研究为实验研究。精分1只雄性SD大鼠肺动脉、肺静脉，肺组织取边缘剪碎，各样本分别用混合酶液消化，以血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)免疫磁珠法分选内皮细胞，用内皮细胞专用培养基培养。倒置显微镜下观察3种肺血管内皮细胞的形态差别，通过免疫荧光鉴定各组细胞纯度。通过免疫荧光和Western blot观察3组细胞血管性血友病因子(vWF)和平滑肌激动蛋白抗体(α-SMA)蛋白表达情况。通过基质胶体外成环实验比较3组细胞1.5、2.5、3.5、4.5、5.5、6.5、7.5 h成环情况。采用SPSS 22.0和FlowJo 10软件进行统计学分析和统计作图。结果:3组细胞24 h后均迅速贴壁，vWF免疫荧光染色均为阳性。3组细胞形态均为铺路石状，其中PAEC为典型的铺路石状，大多数呈椭圆形；而PVEC、PMVEC形态更细长。免疫荧光显示PVEC和PMVEC细胞浆内少量α-SMA蛋白弥散表达[(0.16±0.03)、(0.23±0.01)]，而PAEC中几乎观察不到α-SMA蛋白表达(0.06±0.01)。随着时间推移，3种肺血管内皮细胞成环周长均呈先上升后下降趋势，其中PVEC组成环长度最长。3组细胞成环周长在组间、时点间、时间和组间交互作用差异均具有统计学意义(
P值均<0.01)。
结论:该方法所获得的3种肺血管内皮细胞纯度高，可在体外稳定培养。3种血管内皮细胞生物学功能有差别，其中PVEC体外成环能力最强。PAEC细胞表达α-SMA蛋白量最少。
文献关键词：
肺动脉;肺静脉;微血管;内皮细胞;细胞培养技术
中图分类号：
作者姓名：
江倩;罗晓韵;刘诗韵;吴雪芬;卢文菊;王健;张晨婷
作者机构：
广州医科大学附属第一医院呼吸与危重症医学科 广州呼吸健康研究院 国家呼吸系统疾病临床医学研究中心 国家呼吸医学中心 呼吸疾病国家重点实验室，广州 510120;广州再生医学与健康广东省实验室，广州 510320
文献出处：
引用格式：
[1]江倩;罗晓韵;刘诗韵;吴雪芬;卢文菊;王健;张晨婷-.大鼠肺血管内皮细胞的原代培养及生物学行为比较研究)[J].国际呼吸杂志,2022(05):381-387
A类：
PVEC,FlowJo
B类：
肺血管内皮细胞,原代培养,生物学行为,肺动脉内皮细胞,PAEC,肺静脉,静脉内,肺微血管内皮细胞,PMVEC,外分,培养方法,生物学特征,肺组织,细胞黏附分子,PECAM,CD31,免疫磁珠,磁珠法,分选,倒置,显微镜下,blot,血管性血友病因子,vWF,平滑肌,激动,动蛋白,SMA,基质胶,胶体,成环,统计学分析,作图,贴壁,免疫荧光染色,细胞形态,铺路石,石状,椭圆形,细长,弥散,时间推移,周长,先上,时点,作用差异,细胞生物学功能,蛋白量,细胞培养技术
AB值：
0.249867
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