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一氧化氮合成酶的基因克隆与功能鉴定
文献摘要:
一氧化氮(NO)作为一种极其重要的生物信息分子,其合成依赖于一氧化氮合成酶(NOS),因此NOS在动植物体内发挥着不可替代的作用.本研究通过克隆海洋细菌Exiguobacterium aurantiacum JM-2的一氧化氮合成酶基因,利用Bam HⅠ和HindⅢ对目的基因和载体进行双酶切和连接,然后用热激转化法将目的基因转到大肠杆菌Top 10和BL-21中,使其成功表达,得到转化菌株,再利用IPTG诱导蛋白表达并进行蛋白纯化,最后对该蛋白的活性进行测定和分析.结果表明,当培养基中IPTG的最佳浓度为0.1 mmol/L、诱导时间为5 min时,NOS活性最大.
文献关键词:
基因克隆;蛋白纯化;一氧化氮合成酶;活性测定
中图分类号:
作者姓名:
罗希帆;周灵美;谢晓东;陈帅君;杨红澎;吴疆
作者机构:
天津农学院 农学与资源环境学院,天津 300392
文献出处:
引用格式:
[1]罗希帆;周灵美;谢晓东;陈帅君;杨红澎;吴疆-.一氧化氮合成酶的基因克隆与功能鉴定)[J].天津农学院学报,2022(02):13-17
A类:
aurantiacum,Bam
B类:
一氧化氮合成酶,基因克隆,功能鉴定,NOS,动植物,植物体,海洋细菌,Exiguobacterium,JM,合成酶基,酶基因,Hind,目的基因,双酶,热激,转化法,转到,大肠杆菌,Top,BL,IPTG,蛋白纯化,最佳浓度,诱导时间,活性测定
AB值:
0.372764
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