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碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌染色体介导黏菌素耐药机制研究
文献摘要：
目的 探究碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌(CRKP)药物暴露后染色体序列突变,以及突变与黏菌素耐药之间的关系,为临床合理用药、减少耐药发生提供依据.方法 黏菌素对临床分离株CRKP 12-130最低抑菌浓度(MIC)为0.25 mg/L,将100μL该菌过夜培养菌液分别涂布于含2倍～32倍MIC黏菌素的MH琼脂平板上,获取耐药突变株;采用细菌基因组提取试剂盒提取基因组DNA并进行二代测序;通过PCR法检测黏菌素耐药相关基因.结果 从不同浓度梯度黏菌素的MH琼脂平板中各取50个菌落传代10次后作为受试菌株测其MIC,在2倍MIC和4倍MIC黏菌素的MH琼脂平板上选择出的突变株分别有33株和47株对黏菌素耐药(MIC≥4 mg/L).8倍MIC、16倍MIC和32倍MIC黏菌素的MH琼脂平板上选择出的突变株均对黏菌素耐药.从中挑选40株MIC值不同的菌株进行二代测序,结果显示有15株菌株mgrB基因完全缺失,2株菌株mgrB基因发生部分缺失,2株菌株的mgrB基因中出现替换(G82T),并导致氨基酸序列改变(G28C).利用mgrB基因两翼序列进行PCR引物设计,将PCR产物进行电泳后发现,230株耐药突变株中有103株存在mgrB基因的改变.结论 CRKP在不同浓度的黏菌素选择压力下,均会选择出自发耐药突变株.mgrB基因的完全缺失是造成该类自发突变株对黏菌素耐药的最主要机制.
文献关键词：
碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌;黏菌素;突变;染色体;mgrB基因
中图分类号：
作者姓名：
张一琦;陈欣;聂志妍;郑永贵;苏佳纯
作者机构：
复旦大学附属华山医院抗生素研究所,上海 200040;上海健康医学院
文献出处：
引用格式：
[1]张一琦;陈欣;聂志妍;郑永贵;苏佳纯-.碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌染色体介导黏菌素耐药机制研究)[J].中国感染与化疗杂志,2022(03):322-326
A类：
mgrB,G82T,G28C
B类：
碳青霉烯类耐药肺炎克雷伯菌,黏菌素,耐药机制,CRKP,药物暴露,临床合理用药,临床分离株,最低抑菌浓度,MIC,过夜培养,养菌,菌液,涂布,MH,琼脂,耐药突变,突变株,细菌基因组,试剂盒,二代测序,浓度梯度,菌落,传代,上选,氨基酸序列,序列改变,两翼,引物设计,电泳,选择压力,自发突变
AB值：
0.195818
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