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布鲁氏菌生物恐怖战剂RTqPCR现场检测方法研究
文献摘要：
建立实时荧光定量PCR现场快速检测方法,对生物恐怖战剂布鲁氏菌进行检测.根据NCBI获得16S核糖体RNA基因序列,应用生物信息学确定检测特异性序列,设计扩增引物.通过引物量、退火温度、退火时间,建立3水平3因素正交试验确定试验最佳反应条件,并分析反应的敏感性,利用溶解曲线分析反应的特异性,并采集室外环境积水和土壤样本进行实际测试.结果表明:反应最优条件为Sybr Green qPCR mix 10 μL,上下游引物各0.8 μL,超纯水7.4 μL,引物1μL,检测反应的灵敏度为220 CFU·mL-1,溶解曲线峰值单一,特异性良好.为现场布鲁氏菌基因检测提供一种有效、可靠的快速检测手段.
文献关键词：
布鲁氏菌;生物恐怖;现场检测;实时荧光定量PCR
中图分类号：
作者姓名：
张立安;宗鹏;任小侠;侯亚欣;王楠;王慧飞
作者机构：
烟台市消防救援支队,山东烟台 264000;抚州市消防救援支队,江西抚州 344000;中国兽医药品监察所,北京 100081;中国人民警察大学 研究生院,河北廊坊 065000;中国人民警察大学 侦查学院,河北廊坊 065000
文献出处：
引用格式：
[1]张立安;宗鹏;任小侠;侯亚欣;王楠;王慧飞-.布鲁氏菌生物恐怖战剂RTqPCR现场检测方法研究)[J].中国人民警察大学学报,2022(12):68-74
A类：
RTqPCR,环境积水,Sybr
B类：
布鲁氏菌,生物恐怖,现场检测,现场快速检测,快速检测方法,NCBI,16S,核糖体,基因序列,定检,特异性序列,扩增引物,退火温度,退火时间,反应条件,室外环境,土壤样本,实际测试,最优条件,Green,mix,上下游,超纯水,测反,CFU,曲线峰值,基因检测,检测手段
AB值：
0.359117
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