揭示莲藕渣多糖(Lotus Root Residue Polysaccharide,LRP)对BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞的体外免疫调节作用,探讨LRP刺激腹腔巨噬细胞产生免疫应答的信号通路.利用MTT法测定不同浓度LRP对细胞活力影响;选用不同浓度梯度及同一浓度不同时间点的LRP刺激细胞,Griess法检测细胞NO释放量;半定量PCR检测细胞TLR4、TLR2受体及免疫关联因子(TNF-α、IL-6、iNOS、1L-1β、COX-2、Nfkbia)mRNA的表达,蛋白印迹法检测其MAPK通路(ERK1/2、JNK、p38)及Akt的磷酸化,同时研究了LRP对和蛋白AP-1及NF-κB的影响,对LRP对小鼠腹腔巨噬细胞的免疫调节活性及其信号机制进行评估.研究表明,LRP对小鼠腹腔巨噬细胞无毒作用,25～50μg/mL LRP促进细胞生长,细胞存活率为104.82％和102.53％(p<0.05);NO浓度随LRP浓度提高而显著提高(p<0.05),200μg/mL LRP刺激细胞产生一氧化氮(NO)为36.47μmol/L,200μg/mL的LRP处理细胞,NO产量随培养时间延长而增多(p<0.05),24 h时NO浓度为44.18μmol/L;mRNA基因表达研究显示,LRP调控TLR4、TLR2受体,并调节免疫基因的表达;此外,LRP促进核蛋白c-Jun、p65由核外转向核内,增强ERK1/2、JNK、p38蛋白的磷酸化水平,但对于Akt的磷酸化没有显著影响.因此,莲藕渣多糖(LRP)可通过MAPK/NF-κB途径增强BALB/c小鼠腹腔巨噬细胞免疫应答.

莲藕渣多糖;小鼠腹腔巨噬细胞;免疫应答;MAPK/NF-κB信号通路

管雪婷;韩胜强;谢元;胡卫成;沈婷

新疆农业大学食品科学与药学学院,新疆乌鲁木齐 830052;淮阴师范学院生命科学学院,江苏淮安 223300

现代食品科技

[1]管雪婷;韩胜强;谢元;胡卫成;沈婷-.莲藕渣多糖通过MAPK/NF-κB途径调节小鼠腹腔巨噬细胞的免疫应答)[J].现代食品科技,2022(12):161-168

莲藕渣多糖

MAPK,小鼠腹腔巨噬细胞,Lotus,Root,Residue,Polysaccharide,LRP,BALB,体外免疫,免疫调节作用,MTT,细胞活力,浓度梯度,不同时间点,Griess,释放量,半定量,TLR4,TLR2,iNOS,1L,COX,Nfkbia,蛋白印迹法,ERK1,JNK,p38,Akt,磷酸化,免疫调节活性,信号机制,无毒,细胞生长,细胞存活率,一氧化氮,培养时间,表达研究,调节免疫,免疫基因,核蛋白,Jun,p65,细胞免疫应答

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