典型文献
构建人源化CYP4V2点突变小鼠的CRISPR/Cas9系统
文献摘要：
目的 应用CRISPR/Cas9构建携带人源化CYP4V2突变的小鼠模型,为遗传性视网膜变性提供与临床疾病病变特征相一致的模式动物.方法 应用生物信息学方法,分析现有CYP4V2中我国眼遗传病患者常见突变热点,并根据其致病性以及序列比对,最终选定突变位点.按照tild-CRISPR的方法,构建供体质粒,以及Cas9系统.最后将供体、Cas9mRNA以及gRNAs注射到小鼠受精卵中,测序鉴定是否构建成功.结果 通过gnomAD以及ClinVar数据库,筛选CYP4V2常见的热点突变,经过序列比对,最终选定CYP4V2 c.1091-2 A>G为后续构建模型的致病突变.最终,DNA测序支持构建完成的基因编辑鼠在CYP4V31091-2的位置发生了A>G的突变.mRNA水平不能确定是否发生可变剪切.结论 我们利用CRISPR/Cas技术,成功制备了携带患者特异性遗传突变的小鼠模型,为以后深入探索CYP4V21091-2 A>G点突变的致病机制以及开发相应的基因治疗药物奠定了基础.
文献关键词：
CRISPR/Cas9;人源化小鼠;CYP4V2基因;结晶样视网膜变性
中图分类号：
作者姓名：
赵莹科;方源;钱丽玲;王伟;吴继红
作者机构：
复旦大学附属眼耳鼻喉科医院眼科 上海 200031;上海市视觉损伤与重建重点实验室 上海 200031;国家卫生健康委员会近视眼重点实验室 上海 200031;中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心 上海 200031
文献出处：
引用格式：
[1]赵莹科;方源;钱丽玲;王伟;吴继红-.构建人源化CYP4V2点突变小鼠的CRISPR/Cas9系统)[J].中国眼耳鼻喉科杂志,2022(06):584-588
A类：
CYP4V2,tild,Cas9mRNA,gRNAs,CYP4V31091,CYP4V21091,结晶样视网膜变性
B类：
CRISPR,小鼠模型,遗传性视网膜变性,临床疾病,病变特征,相一致,模式动物,生物信息学方法,遗传病,突变热点,致病性,序列比对,突变位点,供体,质粒,射到,受精卵,gnomAD,ClinVar,热点突变,构建模型,致病突变,基因编辑,可变剪切,遗传突变,致病机制,基因治疗,治疗药物,人源化小鼠
AB值：
0.281523
相似文献
机标中图分类号，由域田数据科技根据网络公开资料自动分析生成，仅供学习研究参考。
