目的 基于Sirt1通路探讨丹参酮ⅡA对巨噬细胞极化的影响及其分子机制.方法 实验分为空白组(正常培养的RAW264.7细胞)、模型组[100 ng/mL脂多糖(LPS)处理24 h]、Sirt1敲降组(LPS+Sirt1 RNA干扰)、丹参酮ⅡA组(丹参酮ⅡA+LPS)及Sirt1敲降+丹参酮组(丹参酮ⅡA+LPS+Sirt1 RNA干扰),各组培养24 h后进行后续实验.CCK8法检测丹参酮ⅡA浓度为5μg/mL、10μg/mL和20μg/mL时RAW 264.7细胞存活率选取最佳干预浓度;流式细胞术检测各组M1、M2型巨噬细胞分布情况;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测Sirt1通路关键蛋白表达;实时定量聚合酶链式反应(qPCR)检测Sirt1通路相关靶点mRNA表达.结果 丹参酮ⅡA能明显抑制LPS诱导的RAW 264.7炎症模型中M1型巨噬细胞增殖(P<0.001),并诱导M2型巨噬细胞增殖(P<0.001);敲降Sirt1基因后,M1型巨噬细胞明显增多(P<0.001),M2型巨噬细胞数下降,但差异无统计学意义(P>0.05);Western Blot结果显示:与模型组比较,丹参酮ⅡA能明显上调Sirt1、Arg1蛋白表达(P<0.01),减少NF-κB及iNOS表达(P<0.05或P<0.01),Sirt1敲降组中炎症相关因子表达升高,Sirt1、PPAR-γ表达减少.与模型组比较,丹参酮ⅡA上调Sirt1、PPAR-γ、Arg1 mRNA表达(P<0.05或P<0.01),抑制NF-κB、iNOS mRNA表达(P<0.01或P<0.01),Sirt1敲降组中Sirt1、PPAR-γ表达减少,NF-κB、iNOS、Arg1表达水平升高.结论 丹参酮ⅡA能够通过激活Sirt1通路调控巨噬细胞M1型向M2型转化,从而抑制炎症反应发生,发挥稳定动脉粥样硬化斑块作用.

动脉粥样硬化;丹参酮ⅡA;炎症;巨噬细胞;极化;Sirt1

宋璐霞;张杰;马丹;樊懿萱;刘启予;赵麟;徐浩

北京中医药大学研究生院,北京 100029;中国中医科学院西苑医院,北京 100091;中国中医科学院西苑医院国家中医心血管病临床医学研究中心,北京 100091

中西医结合心脑血管病杂志

[1]宋璐霞;张杰;马丹;樊懿萱;刘启予;赵麟;徐浩-.丹参酮ⅡA调控Sirt1通路影响巨噬细胞极化的机制研究)[J].中西医结合心脑血管病杂志,2022(07):1210-1216

LPS+Sirt1,A+LPS,A+LPS+Sirt1

丹参酮,巨噬细胞极化,RAW264,脂多糖,降组,组培,CCK8,细胞存活率,流式细胞术,M1,M2,蛋白免疫印迹,Blot,关键蛋白,实时定量聚合酶链式反应,qPCR,炎症模型,Arg1,iNOS,炎症相关因子,PPAR,抑制炎症,稳定动脉粥样硬化斑块

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