典型文献
LncRNA XIST/FUS/TLR9分子轴在 IgA肾病Th17/CD4+T细胞中的表达及其功能性研究
文献摘要：
目的 研究lncRNA XIST在IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)Th17细胞中的表达及功能作用,探讨lncRNA XIST对TLR9 mRNA表达的调控作用.方法 (1)外周血单个核细胞(pe-ripheral blood mononuclear cell,PBMC)体外分离出CD4+T细胞并诱导其分化为Th17细胞;(2)利用质粒转染技术使Th17细胞过表达和沉默表达XIST;(3)流式细胞术与CCK-8实验检测XIST不同表达水平Th 17细胞的增殖能力及凋亡情况变化;(4)qRT-PCR法及Western blot法检测XIST、TLR9mRNA及蛋白水平,并通过荧光素酶报告基因分析和TLR9mRNA半衰期检测,推测XIST对TLR9表达的作用;(5)通过Starbase数据库查找潜在与XIST相互作用的RNA结合蛋白,并进行RNA结合蛋白免疫沉淀、Western blot检测;(6)使用GraphPad 8.0进行统计分析,并以(x-)±s表示.组间差异分别采用t检验或单向方差分析.结果 XIST主要分布在Th17细胞胞质中,推测XIST可能参与转录后调控;lncRNA XIST表达下调促进细胞凋亡、DNA损伤,并通过调节Th17细胞中的TLR9抑制细胞增殖;随着lncRNA XIST高表达,TLR9表达增高,XIST通过促进TLR9 mRNA的稳定性来上调TLR9的表达.FUS(fused in sarcoma)是与XIST相互作用的RNA结合蛋白,FUS抗体可以显著富集XIST转录本.下调lncRNA XIST表达对FUS蛋白的表达没有影响,由此推测XIST可能是通过影响FUS的功能而不是表达来发挥作用的.进一步证实,下调XIST显著降低了 FUS与TLR9 mRNA的结合,FUS过表达挽救了 si-XIST诱导的TLR9下调和降解.结论 lncRNA XIST和TLR9通过RNA结合蛋白FUS介导的信号通路对IgAN中Th17的细胞增殖起着至关重要的作用.
文献关键词：
Th17细胞;增殖;长链非编码RNA XIST;RNA结合蛋白;肾小球肾炎;IgA
中图分类号：
作者姓名：
吴艳萍;马晓;韩四萍;王小琴
作者机构：
湖北中医药大学,武汉430061;湖北中医药大学附属湖北省中医院肾病科,武汉430061
文献出处：
引用格式：
[1]吴艳萍;马晓;韩四萍;王小琴-.LncRNA XIST/FUS/TLR9分子轴在 IgA肾病Th17/CD4+T细胞中的表达及其功能性研究)[J].临床肾脏病杂志,2022(05):396-402
A类：
ripheral,TLR9mRNA
B类：
LncRNA,XIST,FUS,肾病,Th17,CD4+T,lncRNA,nephropathy,IgAN,功能作用,外周血单个核细胞,pe,blood,mononuclear,cell,PBMC,外分,质粒转染,过表达,流式细胞术,CCK,实验检测,细胞的增殖,qRT,blot,荧光素酶报告基因,报告基因分析,半衰期,Starbase,结合蛋白,免疫沉淀,GraphPad,转录后调控,抑制细胞增殖,fused,sarcoma,转录本,达来,挽救,si,长链非编码,肾小球肾炎
AB值：
0.226106
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