典型文献
HBV转基因小鼠肝原代细胞分离纯化及其在肝损伤研究中的应用
文献摘要：
目的 分离鉴定乙型肝炎病毒(HBV)转基因小鼠肝原代细胞,为HBV体外相关研究提供有利模型.方法 HBV转基因C57 BL/6小鼠深度麻醉后,通过二步灌注法,首先用不含钙灌注液将肝中的血液冲洗干净,然后用含钙的IV型胶原缓冲液将肝细胞消化下,通过3次低速低温离心法纯化去除杂质,则成功分离提取肝原代细胞.进而通过糖原染色法对提取的细胞进行鉴定,并检测7 d内肝细胞的增殖活力,以及第1天和第3天细胞凋亡情况.最后,将提取的肝细胞应用于过氧化氢诱导肝细胞损伤表型检测,包括细胞内活性氧、线粒体膜电位、多个氧化应激因子转录水平检测和LDH泄露情况.结果(1)分离的HBV小鼠肝原代细胞为典型性肝细胞形态,并呈现糖原阳性染色结果;(2)肝细胞活性检测发现肝细胞贴壁后,活性增强,第5～6天时活性最高,然后逐渐下降;(3)对比肝细胞提取后第1天和第3天的细胞死亡情况,未发生明显自发性死亡;(4)细胞通过过氧化氢诱导后,发现胞内活性氧积聚,线粒体膜电位改变,氧化应激因子转录水平上调,以及乳酸脱氢酶泄露增加.结论 在本实验条件下,成功分离鉴定HBV小鼠肝原代细胞,并应用于肝损伤相关实验.
文献关键词：
原代细胞;二步灌注法;模型;肝损伤
中图分类号：
作者姓名：
贺云;黄敏健;陈艺生
作者机构：
福建医科大学基础医学院,消化道恶性肿瘤教育部重点实验室,福建省肿瘤微生物学重点实验室,福州 350122;福建省立医院临床医学实验研究中心,福建医科大学,福州 350001
文献出处：
引用格式：
[1]贺云;黄敏健;陈艺生-.HBV转基因小鼠肝原代细胞分离纯化及其在肝损伤研究中的应用)[J].中国实验动物学报,2022(04):526-532
A类：
二步灌注法
B类：
HBV,转基因小鼠,原代细胞,细胞分离,分离纯化,肝损伤,分离鉴定,乙型肝炎病毒,C57,BL,先用,含钙,灌注液,冲洗,干净,IV,缓冲液,低速,离心法,除杂,功分,分离提取,糖原,染色法,细胞的增殖,增殖活力,及第,肝细胞损伤,表型检测,细胞内活性氧,线粒体膜电位,氧化应激因子,转录水平,水平检测,LDH,典型性,细胞形态,原阳,染色结果,肝细胞活性,活性检测,贴壁,天时,细胞提取,细胞死亡,死亡情况,自发性,过过,积聚,乳酸脱氢酶,实验条件
AB值：
0.32944
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