目的 通过微创的方式,利用机械损伤联合脂多糖灌注法构建符合临床损伤特征的宫腔黏连(intrauterine adhesion,IUA)动物模型,为深入研究IUA的发病机制、病理变化及探索临床治疗方案提供支持.方法 取雌性ICR小鼠20只随机分为2组(n=10),间苯三酚松弛宫颈后,造模组动物经宫颈给予宫腔内机械损伤+脂多糖(LPS)灌注(0.5 mg/kg),假手术组动物仅接受等体积生理盐水灌注.分别于术后7、14、21 d收集子宫标本,常规HE和Masson染色,检测子宫内膜形态及纤维化情况;免疫荧光检测子宫内膜中巨噬细胞(F4/80)分布,qPCR及Western Blot检测造模14 d小鼠子宫内膜中炎症因子(IL-1β、TNF-α、IL-4、IL-10和IL-6)及子宫内膜容受性相关标志物(Integrinβ3和LIF)的表达变化.随后,取20只小鼠随机分为经宫颈机械损伤+脂多糖灌注组(n=10)为造模组和假手术组(n=10),造模2周后合笼,记录妊娠母鼠数量;妊娠约18 d处死母鼠,记录胚胎数量.结果 机械损伤+脂多糖灌注后小鼠子宫中炎症反应和纤维化程度显著增加.其中模型组小鼠子宫内膜厚度较假手术组显著降低,子宫内膜细胞坏死明显,腺体缺失,腔上皮和腺上皮细胞结构不完整,组织纤维化严重.随后,检测发现巨噬细胞标志物F4/80在模型组小鼠子宫内膜中表达显著上升(P<0.05),并且模型组小鼠子宫内膜中促炎因子IL-1β、TNF-α、和IL-6表达显著升高(P<0.05),而抑炎因子IL-4、IL-10表达明显下降(P<0.05).进一步研究发现子宫内膜容受性标志物LIF和Integrinβ3表达量显著下降(P<0.05),且生育实验结果发现妊娠母鼠及胎鼠数量均显著下降(P<0.05).结论 本研究通过微创的方式经宫颈机械损伤+脂多糖灌注,成功建立小鼠IUA模型构建方法,符合临床IUA损伤特征,可为后续针对IUA发病机制及治疗方法研究提供稳定的动物模型.

宫腔粘连;机械损伤;脂多糖;动物模型

常品;张胜辉;陈童彤;孙钰椋;张花;潘莹;刘彦礼;林俊堂

新乡医学院第三附属医院,河南 新乡 453003;新乡医学院干细胞与生物治疗技术研究中心,河南 新乡 453003;新乡医学院生命科学技术学院,河南 新乡 453003;新乡医学院医学工程学院,河南 新乡 453003

中国实验动物学报

[1]常品;张胜辉;陈童彤;孙钰椋;张花;潘莹;刘彦礼;林俊堂-.经宫颈机械损伤联合脂多糖灌注法构建小鼠宫腔黏连模型)[J].中国实验动物学报,2022(03):400-407

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