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聚乙烯亚胺负载基因和蛋白质共递送实验
文献摘要:
通过构建载体/基因/蛋白共递送复合体系,探讨了阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI,25 kDa)负载基因和蛋白在细胞中共递送的效率.实验采用凝胶阻滞电泳确定了聚乙烯亚胺与蛋白、基因形成稳定复合物的最佳质量比为2:1:0.05.激光扫描共聚焦成像结果表明,聚乙烯亚胺可以有效递送Cy5-pDNA和FITC-BSA进入细胞.通过β-半乳糖苷酶(β-Gal)原位染色法、Western blot和Caspase-3活性检测实验,进一步分析了递送蛋白β-Gal的活性和p53基因的转录翻译功能.结果显示,PEI介导递送的β-Gal保持了较高的酶活性,可以有效催化底物的分解.共负载p53基因转染细胞后,p53蛋白表达水平显著上调且可以激活p53蛋白相关信号通路中关键性激酶Caspase-3.
文献关键词:
聚乙烯亚胺;共递送;转染效率;β-半乳糖苷酶;p53基因
中图分类号:
作者姓名:
刘艳红;李静;王娜;李坤;张骥;余孝其
作者机构:
四川大学基础化学实验教学中心,成都610064;四川大学化学学院,成都610064
文献出处:
引用格式:
[1]刘艳红;李静;王娜;李坤;张骥;余孝其-.聚乙烯亚胺负载基因和蛋白质共递送实验)[J].实验室研究与探索,2022(09):45-49
A类:
B类:
聚乙烯亚胺,共递送,复合体系,阳离子聚合物,PEI,kDa,电泳,复合物,激光扫描共聚焦,共聚焦成像,Cy5,pDNA,FITC,BSA,半乳糖,糖苷酶,Gal,染色法,blot,Caspase,活性检测,p53,底物,基因转染,蛋白表达水平,白相,转染效率
AB值:
0.282869
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