建立CMAB008单抗阳离子交换层析介质寿命确认方案,采用实际生产的工艺参数进行缩小模型试验,以考察Nuvia S层析介质循环到100次后性能指标是否还满足层析需要.按试验方案对Nuvia S层析介质循环到100次,分别在使用前和循环使用20、40、50、70、90次后对层析柱进行柱效测试,以考察随循环次数的增加,层析介质对层析柱对称因子、理论塔板数的影响;对循环1、50、51、100次的层析柱进行动态载量测试,以考察洗脱峰的ProteinA残留、HCP残留、DNA残留、毛细管电泳纯度、SEC-HPLC纯度、活性、得率;以不同上样量20 g/L(循环8、48、88次)、40 g/L(循环9、49、89次)、80 g/L(循环61、62、63次),不同流速110 cm/h(循环10、50、92次)、149 cm/h(循环61、62、63次)、170 cm/h(循环11、59、93次)上样以考察阳离子交换层析洗脱峰SEC-HPLC纯度、得率.结果表明,使用前和循环使用20、40、50、70、90次后柱效测试中,所有对称因子、理论塔板数均在可接受的标准范围内;循环1、50、51、100次的层析柱动态载量测试结果均高于起始动态载量的80％,洗脱峰的ProteinA、HCP、DNA残留检测未有增高趋势,毛细管电泳纯度、SEC-HPLC纯度、活性以及得率未有下降趋势;上样测试结果显示,洗脱峰的SEC-HPLC纯度无明显变化趋势,均大于98％,得率均大于85％.这些试验结果均符合CMAB008原液纯化工艺要求.结果证明,Nuvia S层析介质在循环到100次时性能指标没有下降,可以保证纯化CMAB008单抗产品的质量.

CMAB008单抗;层析介质寿命;缩小模型;性能指标

邵顺儒;郭清城;侯盛;袁秀珍;徐忠升;范文强;张蕙;朱红帅;邵景德

江苏泰州迈博太科药业有限公司,江苏泰州225300;上海迈泰君奥生物技术有限公司,上海201200

江苏农业科学

[1]邵顺儒;郭清城;侯盛;袁秀珍;徐忠升;范文强;张蕙;朱红帅;邵景德-.CMAB008单抗阳离子交换层析介质寿命确认)[J].江苏农业科学,2022(08):69-73

CMAB008,层析介质寿命,Nuvia,ProteinA

单抗,阳离子交换,离子交换层析,缩小模型,模型试验,试验方案,循环使用,层析柱,循环次数,理论塔板数,载量,洗脱,HCP,毛细管电泳,SEC,HPLC,得率,同上,上样量,标准范围,残留检测,原液,纯化工艺,工艺要求

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