典型文献
棉纤维起始分化期基因枪介导的GhSuSy表达分析
文献摘要：
蔗糖合酶(sucrose synthase)通过调节植物糖代谢介导棉纤维的起始和发育.为进一步研究棉纤维起始分化过程中蔗糖合酶的转录调控机制,克隆了GhSuSy基因5′端上游2000 bp的启动子片段,构建了含LUC荧光报告基因的重组载体,采用基因枪瞬时转化技术,把重组载体DNA分别转化到棉花叶片和花瓣,比较分析了不同载体膜压力、不同轰击距离与孵育时间等条件下的荧光素酶(luciferase,LUC)活性.用优化后的条件检测了棉纤维起始分化期蔗糖合酶基因GhSuSy偶联的LUC在叶片和花瓣中的活性,并与GhSuSy表达、蔗糖合酶活性比较分析.结果显示:-0.09 MPa真空度下,可裂膜压力设为6.80 MPa,载体膜距离叶片7 cm,轰击2次转化效率最高,转化后样品孵育16 h左右LUC荧光信号最强;与叶片中LUC表达相比,花瓣中LUC荧光信号强、活性高,特别是开花当天(0 d)和开花后1 d(1 DPA)差异明显;在纤维起始分化的开花前3 d(-3 DPA)到开花后3 d(3 DPA),叶片和花瓣中LUC活性先升高后降低,在0和1 DPA的LUC活性最高,这一结果与GhSuSy的定量分析、蔗糖合酶活性检测结果趋于一致,同时纤维起始时期胚珠中GhSuSy的表达和蔗糖合酶活性也显著升高.这些结果暗示GhSuSy基因或编码的蔗糖合酶在0和1 DPA可能调控了棉纤维的起始和分化,表明基因枪介导的瞬时转化系统可用于进一步的GhSuSy基因启动子转录调控分析.
文献关键词：
棉纤维;GhSuSy基因;蔗糖合酶;基因枪瞬时表达
中图分类号：
作者姓名：
吕淑芳;张红晓;胥华伟;赵杏利
作者机构：
河南科技大学 农学院,河南 洛阳471003
文献出处：
引用格式：
[1]吕淑芳;张红晓;胥华伟;赵杏利-.棉纤维起始分化期基因枪介导的GhSuSy表达分析)[J].浙江农业学报,2022(07):1361-1368
A类：
GhSuSy,基因枪瞬时表达
B类：
棉纤维,表达分析,蔗糖合酶,sucrose,synthase,糖代谢,转录调控机制,端上,bp,LUC,报告基因,重组载体,瞬时转化,棉花,花叶,花瓣,轰击,击距,孵育时间,荧光素酶,luciferase,酶基因,偶联,真空度,转化效率,荧光信号,开花,当天,DPA,活性检测,胚珠,暗示,转化系统,基因启动子
AB值：
0.226324
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