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旋毛虫HSP70蛋白诱导大鼠心肌细胞线粒体凋亡机制的研究
文献摘要:
为了解旋毛虫HSP70致心肌损伤的机制,本研究将不同浓度旋毛虫重组HSP70蛋白(Ts-Hsp70)与大鼠心肌细胞H9c2共孵育后,采用CCK-8试剂盒筛选Ts-Hsp70作用H9c2细胞的最适浓度.以最适浓度Ts-Hsp70与H9c2细胞共孵育不同时间后,采用微孔板法检测细胞培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)的含量,采用比色法检测细胞培养上清液中心肌细胞损伤标志物肌酸激酶(CK)的含量,采用免疫荧光检测Ts-Hsp70作用后H9c2.细胞活性氧(ROS)的释放,采用qPCR和western blot方法检测Ts-Hsp70作用后的H9c2细胞线粒体凋亡与抗凋亡途径中的Bax、Caspase-3、Caspase-9、Cytochrome C与Bcl-2的基因转录水平与蛋白表达水平.结果显示,经最适浓度为60 μg/mL的Ts-Hsp70分别刺激H9c2细胞6h、12h和18h后,随着Ts-Hsp70对H9c2细胞作用时间的延长,LDH、CK、ROS含量与Bax、Cytochrome C及激活状态下的Caspase-3、Caspase-9基因转录水平与蛋白表达水均升高,且均于作用12h时达峰值,显著高于对照组(P<0.01),而线粒体抗凋亡基因Bcl-2基因转录水平与蛋白表达水平随着Ts-Hsp70对H9c2细胞作用时间的延长均逐渐降低,且均于作用12h时达谷值,显著低于对照组(P<0.01).本研究首次证实Ts-Hsp70可增加细胞中LDH、CK、ROS的含量,激活并调节H9c2细胞中的线粒体凋亡通路,该研究结果为进一步研究旋毛虫致心肌损伤机制提供了基础数据.
文献关键词:
旋毛虫;重组HSP70蛋白;心肌细胞;线粒体凋亡通路
中图分类号:
作者姓名:
王姗姗;刁子洋;郭琨;王雪莹;侯嘉明;薄禄琪;王爽;宋铭忻
作者机构:
东北农业大学动物源性人兽共患病黑龙江省重点实验室,黑龙江 哈尔滨 150030
文献出处:
引用格式:
[1]王姗姗;刁子洋;郭琨;王雪莹;侯嘉明;薄禄琪;王爽;宋铭忻-.旋毛虫HSP70蛋白诱导大鼠心肌细胞线粒体凋亡机制的研究)[J].中国预防兽医学报,2022(08):881-887
A类:
B类:
旋毛虫,HSP70,大鼠心肌细胞,心肌损伤,Ts,Hsp70,H9c2,孵育,CCK,试剂盒,最适浓度,微孔板法,细胞培养,养上,上清液,乳酸脱氢酶,LDH,比色法,心肌细胞损伤,肌酸激酶,免疫荧光检测,细胞活性,ROS,qPCR,western,blot,抗凋亡,Bax,Caspase,Cytochrome,Bcl,基因转录水平,蛋白表达水平,6h,12h,18h,作用时间,激活状态,凋亡基因,谷值,加细,线粒体凋亡通路,损伤机制
AB值:
0.218644
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