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Slfn5基因条件性敲除小鼠模型的构建
文献摘要：
目 的 应用CRISPR/Cas9技术构建Slfn5基因条件性敲除小鼠模型并进行初步表型鉴定,为Slfn5功能及机制研究提供动物模型.方法 根据Slfn5的基因结构,选择外显子3作为敲除区域(flox区域).采用受精卵同源重组的方式,将针对Slfn5基因设计的gRNA(guide RNA)、Cas9 mRNA以及含有flox区域的同源重组质粒显微注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中并获得F0代小鼠.PCR扩增及测序鉴定阳性的F0代小鼠与C57BL/6J野生型小鼠交配,获得F1代Slfn5 flox/+杂合子小鼠.此杂合子小鼠自交,得到F2代Slfn5flox/flox纯合子小鼠.最后,将F2代Slfn5flox/flox纯合子小鼠与Dppa3-Cre鼠杂交,得到flox纯合且Cre阳性小鼠即Slfn5敲除小鼠.结果 获得Slfn5敲除小鼠模型,PCR及测序鉴定为Slfn5基因条件性敲除小鼠.与野生型小鼠相比,Slfn5基因敲除的小鼠血常规中淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞数量明显增多(P＜0.05).结论 应用CRISPR/Cas9技术成功建立Slfn5基因敲除小鼠动物模型,为研究Slfn5在乳腺癌和免疫系统的生物学功能及作用机制奠定实验基础.
文献关键词：
基因敲除;CRISPR/Cas9技术;Schlafen家族成员-5
中图分类号：
作者姓名：
李婧铱;吕昌莲;贾迪;顾雪锋;万国庆;赵炜明
作者机构：
齐齐哈尔医学院医学技术学院,黑龙江齐齐哈尔161006;上海健康医学院分子影像学重点实验室,上海201318;黑龙江中医药大学基础医学院,黑龙江哈尔滨150040
文献出处：
引用格式：
[1]李婧铱;吕昌莲;贾迪;顾雪锋;万国庆;赵炜明-.Slfn5基因条件性敲除小鼠模型的构建)[J].哈尔滨医科大学学报,2022(06):551-556
A类：
Slfn5,Slfn5flox,Schlafen
B类：
条件性敲除,小鼠模型,CRISPR,Cas9,技术构建,表型鉴定,基因结构,外显子,受精卵,同源重组,gRNA,guide,重组质粒,显微注射,射到,C57BL,6J,F0,野生型,交配,杂合子,自交,F2,纯合子,Dppa3,Cre,血常规,单核细胞,嗜酸性粒细胞,细胞数量,基因敲除小鼠,小鼠动物模型,免疫系统,生物学功能
AB值：
0.211946
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