典型文献
基于染料标记的核酸适配体对氯霉素的比率定量检测
文献摘要:
利用荧光染料标记的氯霉素(CAP)核酸适配体(PLV)、有机猝灭基团标记且与CAP核酸适配体部分互补的单链DNA(PC)及核酸染料SYBR Green Ⅰ(SG-Ⅰ)构建了一种比率型荧光探针,并利用该探针建立了一种CAP的定量检测新方法.该探针中,PLV的3'端标记荧光染料6-carboxy-x-rhodamine(ROX),PC的5'端标记猝灭基团Black Hole Quencher 2(BHQ-2).当反应体系中没有CAP时,PLV与PC反应形成双链DNA,荧光染料ROX与猝灭基团BHQ-2相互靠近,ROX的荧光被BHQ-2猝灭,其荧光信号很弱.此时,溶液中的核酸染料SG-Ⅰ可与双链DNA结合,导致SG-Ⅰ的荧光信号显著增强.当体系中存在CAP时,CAP与PLV结合形成更稳定的空间结构,使双链DNA不能形成.此时,荧光染料ROX远离猝灭基团BHQ-2,其荧光得到恢复;另外,由于体系中无双链DNA,SG-Ⅰ游离于溶液中,其荧光信号很弱.根据体系中加入CAP后ROX与SG-Ⅰ荧光强度比值(IROX/ISG-Ⅰ)的变化即可实现对CAP的定量检测.在优化条件下,CAP浓度在2×10-10~100X 10-10 mol/L范围内,IROX/ISG-Ⅰ随CAP浓度的增大而增大,其拟合曲线的回归方程为IROX/ISG-Ⅰ=0.072e0055c(R=0.993),方法检出限为8×10-11mol/L.与单色荧光定量检测CAP的方法相比,该方法重复性更好、检出限更低、准确度更高.
文献关键词:
比率型荧光探针;核酸适配体;氯霉素;定量检测
中图分类号:
作者姓名:
熊威威;汪鹏;李文恒;向东山;翟琨
作者机构:
湖北民族大学 生物资源保护与利用湖北省重点实验室,湖北恩施445000;湖北民族大学 化学与环境工程学院,湖北 恩施445000
文献出处:
引用格式:
[1]熊威威;汪鹏;李文恒;向东山;翟琨-.基于染料标记的核酸适配体对氯霉素的比率定量检测)[J].武汉大学学报(理学版),2022(04):405-412
A类:
Quencher,IROX,100X,072e0055c,11mol
B类:
核酸适配体,氯霉素,率定,荧光染料,CAP,PLV,猝灭,基团,单链,核酸染料,SYBR,Green,比率型荧光探针,carboxy,rhodamine,Black,Hole,BHQ,反应体系,成双,双链,荧光信号,很弱,更稳,光得,无双,荧光强度比,ISG,优化条件,拟合曲线,方法检出限,单色,荧光定量检测
AB值:
0.218704
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