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典型文献
川芎α-淀粉酶抑制剂基因的原核表达与条件优化
文献摘要:
利用实验室前期已获得的α-淀粉酶抑制剂基因(LASI),将其分别连接到不同载体上构建重组原核表达质粒,在原核表达系统中诱导表达LASI重组蛋白,并优化其诱导条件.通过Western Blot分析鉴定LASI重组蛋白,并采用碘-淀粉呈色法测定LASI对猪源淀粉酶的抑制活性.结果表明:pET28a是LASI的较好表达载体,当诱导时间为8 h,IPTG终浓度为1.0 mmol/L,诱导温度为27℃时,LASI重组蛋白的表达量达到最佳;在最优的诱导表达条件下,表达出的部分LASI重组蛋白以可溶性蛋白的形式存在,并能够与HIS标签单抗杂交;经纯化后获得的LASI重组蛋白对猪源淀粉酶存在抑制作用,终抑制比为34%.研究优化LASI重组蛋白的表达条件,获得足量的LASI重组蛋白,为进一步研究LASI的功能奠定基础.
文献关键词:
川芎;α-淀粉酶抑制剂;原核表达;条件优化
作者姓名:
邓楷煜;安秋菊;陈安琪;俞继华;张富丽;廖海
作者机构:
西南交通大学 生命科学与工程学院,成都610031;四川省农业科学院分析测试中心,成都610066
文献出处:
引用格式:
[1]邓楷煜;安秋菊;陈安琪;俞继华;张富丽;廖海-.川芎α-淀粉酶抑制剂基因的原核表达与条件优化)[J].生物学杂志,2022(04):7-11,17
A类:
LASI
B类:
川芎,淀粉酶,酶抑制剂,原核表达,条件优化,接到,质粒,表达系统,诱导表达,重组蛋白,诱导条件,Blot,分析鉴定,呈色,猪源,抑制活性,pET28a,表达载体,诱导时间,IPTG,达到最佳,可溶性蛋白,HIS,签单,单抗,研究优化,足量
AB值:
0.261984
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