目的 基于TGF-β1/Foxp3/RORγt通路探讨清窍胶囊对分泌性中耳炎大鼠的作用机制.方法 36只雌性SD大鼠,其中30只构建分泌性中耳炎大鼠模型,造模成功后,30只大鼠随机分为模型组、强的松组(0.003 g/100 mL)、清窍胶囊低剂量治疗组(0.36 g/100 mL)、清窍胶囊中剂量治疗组(0.54 g/100 mL)、清窍胶囊高剂量治疗组(0.72 g/100 mL),每组6只,另6只设为空白对照组.治疗组分别按不同剂量灌胃给药,模型组与空白对照组灌服相同容积的蒸馏水,1次/天,连续14天.给药结束采血,处死,采样待检.苏木精-伊红染色(Hematoxylin-eosin stain,HE)染色观察各组大鼠中耳炎症细胞的变化;酶联免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测血清白介素-4(Interleukin-4,IL-4)、β-转化生长因子(Transforming growth factor beta,TGF-β)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)、γ-干扰素(Interferonγ,IFN-γ)、白介素-10(Interleukin-10,IL-10)、白介素-17(Interleukin-17,IL-17)水平;流式细胞技术检测脾脏和胸腺Th17/Treg细胞含量;实时荧光定量PCR检测脾脏和胸腺组织叉头盒P3(Forkhead Box P3,FOXP3)、IL-17、维甲酸相关核孤儿受体γt(Retinoic acid-related orphan receptorγt,RORγt)mRNA表达;蛋白质免疫印迹(Western Blot,WB)检测脾脏和胸腺组织RORγT、Foxp3表达.结果 与空白组比较,分泌性中耳炎大鼠黏膜层明显增厚,有大量炎性细胞浸润;且TGF-β、IL-6、IFN-γ、Th17、Treg细胞、IL-17、RORγT水平明显升高,IL-10、IL-4、Foxp3水平明显降低(P<0.01);与模型组比较,清窍胶囊高剂量组可明显改善中耳炎炎细胞浸润,明显降低模型大鼠TGF-β、IL-6、IFN-γ、IL-17水平,明显升高IL-10、IL-4水平(P<0.05),并明显降低模型大鼠Treg细胞、RORγT水平,明显升高Foxp3表达(P<0.05).结论 清窍胶囊可有效地调节TGF-β/Foxp3/RORγt信号通路,进而调节Treg和Th17细胞介导的中耳炎的发生及发展,改善分泌性中耳炎.

分泌性中耳炎;清窍胶囊;免疫失衡;大鼠

钟伦坤;胡文健;周兴玮;何娴;朱佳丽;陈龙;田柳;邵建华;孙永东

西南医科大学附属中医医院 泸州 646699

世界科学技术-中医药现代化

[1]钟伦坤;胡文健;周兴玮;何娴;朱佳丽;陈龙;田柳;邵建华;孙永东-.基于TGF-β1/Foxp3/RORγt通路探讨清窍胶囊对分泌性中耳炎大鼠的作用机制)[J].世界科学技术-中医药现代化,2022(01):379-387

清窍胶囊

TGF,Foxp3,ROR,分泌性中耳炎,雌性,大鼠模型,强的松,囊中,高剂量,空白对照,不同剂量,灌胃给药,蒸馏水,采血,处死,苏木,木精,伊红,Hematoxylin,eosin,stain,HE,炎症细胞,酶联免疫吸附,Enzyme,linked,immunosorbent,assay,清白,白介素,Interleukin,转化生长因子,Transforming,growth,beta,干扰素,Interferon,IFN,流式细胞技术,脾脏,胸腺,Th17,Treg,叉头盒,Forkhead,Box,FOXP3,维甲酸,孤儿,Retinoic,acid,related,orphan,receptor,蛋白质免疫印迹,Blot,WB,黏膜层,增厚,炎性细胞浸润,炎炎,炎细胞浸润,模型大鼠,免疫失衡

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