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IKKβ缺失和NF-κB p65缺失对小鼠成骨细胞分化的影响
文献摘要:
目的:探讨IKKβ和NF-κB p65缺失对小鼠成骨细胞分化的影响.方法:使用CRISPR/Cas9基因编辑工具分别敲除小鼠前成骨细胞MC3T3-E1中的Ikbkb或Rela基因,获得不表达IKKβ或NF-κB p65蛋白的Ikbkb-/-MC3T3-E1 和 Rela-/-MC3T3-E1 细胞.用 10 mmol/L β-甘油磷酸+50 mg/L 抗坏血酸诱导 MC3T3-E1、Ikbkb-/-MC3T3-E1、Rela-/-MC3T3-E1细胞成骨分化.诱导培养4 d后,qPCR法检测细胞中成骨分化标志性基因Sp7、A1-pl、Spp1、Bglap mRNA的表达,Western blot法检测细胞中成骨分化相关蛋白ALPL、FZD9的表达;16 d后,茜素红染色法检测细胞外基质矿化水平.结果:诱导培养后Ikbkb-/-MC3T3-E1细胞中Sp7、Alpl、Bglap mRNA表达以及ALPL、FZD9蛋白表达高于 MC3T3-E1 细胞和 Rela-/-MC3T3-E1 细胞(P<0.010);Ikbkb-/-MC3T3-E1 细胞外基质矿化水平高于 MC3T3-E1 和 Rela-/-MC3T3-E1 细胞(P<0.010),而 Rela-/-MC3T3-E1 与 MC3T3-E1 细胞比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:IKKβ缺失与NF-κB p65缺失在成骨细胞分化过程中的功能可能不同,IKKβ缺失促进成骨细胞分化,而NF-κB p65缺失则无此作用.
文献关键词:
成骨细胞;IKKβ;NF-κB p65;NF-κB信号通路;细胞分化调控;小鼠
中图分类号:
作者姓名:
郝倩云;刘壮壮;周斌辉;冯心雨;黄蓉
作者机构:
北京大学肿瘤医院暨北京市肿瘤防治研究所胸部肿瘤内二科,恶性肿瘤发病机制及转化研究教育部重点实验室 北京100142;新乡医学院精神神经医学研究院 河南新乡453000;新乡医学院医学检验学院 河南新乡453000
文献出处:
引用格式:
[1]郝倩云;刘壮壮;周斌辉;冯心雨;黄蓉-.IKKβ缺失和NF-κB p65缺失对小鼠成骨细胞分化的影响)[J].郑州大学学报(医学版),2022(03):324-329
A类:
Ikbkb,Sp7,Bglap,FZD9,Alpl
B类:
IKK,p65,成骨细胞分化,CRISPR,Cas9,基因编辑工具,敲除小鼠,小鼠前成骨细胞,MC3T3,E1,Rela,+50,抗坏血酸,成骨分化,诱导培养,qPCR,A1,Spp1,blot,ALPL,茜素红,染色法,细胞外基质,基质矿化,促进成骨,细胞分化调控
AB值:
0.168034
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