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改造细菌基因组的双重选择系统的构建
文献摘要：
对细菌基因的敲除与回补可以用于基因功能的研究和基因组的改造.传统的Red同源重组敲除系统依赖于抗性标记基因的正向选择,无法实现基因回补菌株的选择.文章通过构建具有独特优势的双重选择系统,将2种选择标记基因tetA和sacB构建到一个自杀质粒中,该质粒含有tetA-sacB双基因盒,可以利用该双基因盒的双重选择作用实现细菌基因组中基因的敲除与回补.结果表明:在敲除大肠杆菌MG1655中的lacZ基因时,利用构建的双重选择系统中tetA的抗生素耐药性成功筛选到阳性克隆;利用双重选择系统的反向选择作用,在含有镰刀菌酸和蔗糖的培养基上进行筛选,实现了lacZ基因的回补.
文献关键词：
大肠杆菌;同源重组;双重选择系统;基因敲除;基因回补
中图分类号：
作者姓名：
李文静;杨桂霞;周贤轩;陈婷婷;石春红
作者机构：
合肥工业大学 食品与生物工程学院,安徽 合肥 230601
文献出处：
引用格式：
[1]李文静;杨桂霞;周贤轩;陈婷婷;石春红-.改造细菌基因组的双重选择系统的构建)[J].合肥工业大学学报（自然科学版）,2022(12):1699-1704
A类：
双重选择系统
B类：
细菌基因组,基因功能,Red,同源重组,抗性标记,标记基因,正向选择,基因回补,选择标记,tetA,sacB,自杀,质粒,双基,基因盒,选择作用,大肠杆菌,MG1655,lacZ,因时,抗生素耐药性,镰刀菌,蔗糖,基因敲除
AB值：
0.326066
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